二甲磺基乙烷處理生精小管體外培養(yǎng)模型的建立

【摘要】：目的建立二甲磺基乙烷(EDS)處理生精小管的體外培養(yǎng)模型。方法雄性SD大鼠于實(shí)驗(yàn)前7 d腹腔注射EDS,分離生精小管進(jìn)行體外培養(yǎng),分為基礎(chǔ)處理組(加入胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-亞硒酸鈉培養(yǎng)基添加劑ITS,即ITS組)和促黃體素(LH)處理組(加入ITS和LH,即ITS+LH組),采用Ed U標(biāo)記技術(shù)檢測(cè)睪丸間質(zhì)干細(xì)胞增殖情況,放射免疫分析技術(shù)及3β-HSD染色檢測(cè)睪酮分泌及睪丸間質(zhì)干細(xì)胞的分化情況。取雄性成年小鼠睪丸并分離生精小管,分別以不同濃度的EDS處理,其后再進(jìn)行分組(ITS組和ITS+LH組)處理連續(xù)培養(yǎng),采用放射免疫法檢測(cè)培養(yǎng)基上清液中睪酮的分泌情況。結(jié)果與ITS組比較,大鼠生精小管ITS+LH組睪丸間質(zhì)干細(xì)胞增殖較為明顯。睪酮的分泌呈現(xiàn)與體內(nèi)睪丸間質(zhì)細(xì)胞發(fā)育分化趨勢(shì)一致;且該模型在LH作用下,睪酮產(chǎn)生量大,持續(xù)時(shí)間長(zhǎng),表明該模型對(duì)LH敏感。1.72 mmol/L EDS可有效殺死小鼠生精小管上的成熟睪丸間質(zhì)細(xì)胞;該處理模型在經(jīng)過培養(yǎng)后又有睪酮的產(chǎn)生,且ITS+LH組生精小管培養(yǎng)上清液中睪酮含量顯著高于ITS組(P0.01),表明EDS可以殺死成熟睪丸間質(zhì)細(xì)胞,同樣該模型也表現(xiàn)出對(duì)LH敏感。結(jié)論雄性大鼠和小鼠生精小管體外培養(yǎng)模型中,睪丸間質(zhì)干細(xì)胞的發(fā)育分化過程與體內(nèi)睪丸間質(zhì)干細(xì)胞的發(fā)育分化相似,該模型是一個(gè)研究睪丸間質(zhì)細(xì)胞發(fā)育分化的合適模型。 【作者單位】： 廣東省生物制品與藥物研究所;暨南大學(xué)醫(yī)藥生物技術(shù)研究開發(fā)中心;暨南大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)系;
【關(guān)鍵詞】： 生精小管 睪丸間質(zhì)細(xì)胞 二甲磺基乙烷 促黃體素
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81070477,31000663,31271607) 中央高?；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金(21611378) 廣東省高等學(xué)校珠江學(xué)者崗位計(jì)劃資助項(xiàng)目(2012)~~
【分類號(hào)】：Q492.4
【正文快照】： 睪丸間質(zhì)細(xì)胞(Leydig cell)是由德國(guó)科學(xué)家Franz Leydig于1850年發(fā)現(xiàn)并命名的,是哺乳動(dòng)物睪丸間質(zhì)中的一種內(nèi)分泌細(xì)胞,具有合成和分泌睪酮的功能,是男性體內(nèi)雄激素的最主要來源[1],LC的發(fā)育、數(shù)量及雄激素合成功能對(duì)男性的各個(gè)方面都具有決定性的影響。睪丸間質(zhì)細(xì)胞在其分化發(fā)

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