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椰子油對(duì)不同日糧條件下綿羊瘤胃微生物及甲烷產(chǎn)量的影響

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時(shí)間:2024-08-18 21:15:56
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椰子油對(duì)不同日糧條件下綿羊瘤胃微生物及甲烷產(chǎn)量的影響【摘要】:本文以8只裝有永久性瘤胃瘺管的綿羊?yàn)閷?shí)驗(yàn)動(dòng)物,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-timePCR)技術(shù),研究日糧中添加椰

【摘要】: 本文以8只裝有永久性瘤胃瘺管的綿羊?yàn)閷?shí)驗(yàn)動(dòng)物,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-timePCR)技術(shù),研究日糧中添加椰子油對(duì)綿羊瘤胃微生物群落結(jié)構(gòu),產(chǎn)甲烷菌數(shù)量的影響;并結(jié)合Tunnel技術(shù),對(duì)綿羊瘤胃甲烷產(chǎn)量進(jìn)行了實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè),從反芻動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)及分子生物學(xué)方面初步探討了椰子油對(duì)瘤胃甲烷產(chǎn)量生成途徑的調(diào)控機(jī)制。 試驗(yàn)分為四組,分別為: T_1(只飼喂燕麥干草為基礎(chǔ)日糧)、T_2(基礎(chǔ)日糧為燕麥干草,補(bǔ)飼玉米精料,日糧粗精比為6:4)、T_3(基礎(chǔ)日糧為燕麥干草,補(bǔ)飼玉米精料,日糧粗精比為6:4,添加12g/d椰子油)、T_4(基礎(chǔ)日糧為燕麥干草,添加12g/d椰子油)。其中椰子油的添加量為12g/d。并獲得以下主要研究結(jié)果: 1.瘤胃瘺管是研究反芻動(dòng)物消化功能、微生態(tài)環(huán)境和生理生化指標(biāo)等常用的實(shí)驗(yàn)手段,因此經(jīng)反復(fù)多次實(shí)踐,設(shè)計(jì)了一種新型的綿羊瘤胃瘺管,嘗試采用局部麻醉和傳導(dǎo)麻醉相結(jié)合的方法,對(duì)四只綿羊進(jìn)行了瘤胃瘺管手術(shù),術(shù)后羊只均恢復(fù)良好、無(wú)感染、無(wú)瘤胃液的外漏情況出現(xiàn)。該瘤胃瘺管較傳統(tǒng)瘺管有明顯優(yōu)勢(shì),值得推廣。 2.采用Real-time PCR技術(shù)定量技術(shù)對(duì)綿羊瘤胃液中瘤胃真菌(Ruminococcus Fungi)、黃色瘤胃球菌(Ruminococcus flavefaciens)、瘤胃甲烷菌(Ruminococcus methanogen)、琥珀酸絲狀桿菌(Fibrobacter succinogenes)數(shù)量進(jìn)行實(shí)時(shí)定量監(jiān)測(cè),定量結(jié)果表明:在以燕麥干草(T1)為基礎(chǔ)日糧下,添加精料(T2)和椰子油組(T3)產(chǎn)甲烷菌數(shù)量明顯受到抑制,分別降低了61.8%和91.6%。實(shí)驗(yàn)中添加精料,綿羊黃色瘤胃球菌數(shù)量在添加精料后增加了了69.1%,而瘤胃厭氧真菌顯著降低(P0.01),與燕麥干草組(T1)相比降低了下降了98.8%,琥珀酸絲狀桿菌則比T1 (oat)減少了98.5%,證實(shí)了椰子油對(duì)綿羊瘤胃發(fā)酵尤其是纖維素的降解具有一定負(fù)面效應(yīng)。 3.采用Tunnel方法對(duì)綿羊瘤胃甲烷監(jiān)測(cè)表明,椰子油對(duì)綿羊甲烷排放具有明顯的影響。其中在燕麥及精料中添加椰子油,甲烷產(chǎn)量下降了65.2%,而燕麥干草直接添加椰子油使綿羊瘤胃甲烷產(chǎn)量下降了75%,同甲烷菌的下降趨勢(shì)趨同。研究椰子油對(duì)瘤胃發(fā)酵特性的影響,不同處理間,綿羊的瘤胃pH維持在6.45~7.15之間,適合瘤胃微生物生長(zhǎng),添加椰子油后瘤胃液NH3-N濃度明顯降低,隨著椰子油的添加,乙酸濃度有降低的趨勢(shì),而丙酸濃度則有上升的趨勢(shì),乙酸/丙酸與對(duì)照組相比顯著降低(P0.05)。 【關(guān)鍵詞】:椰子油 甲烷 綿羊 瘤胃發(fā)酵
【學(xué)位授予單位】:甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2008
【分類(lèi)號(hào)】:S826
【目錄】:
  • 摘要2-4
  • Abstract4-9
  • 第一章 文獻(xiàn)綜述9-29
  • 1 引言9-11
  • 2 瘤胃微生物的主要種類(lèi)及功能11-14
  • 2.1 細(xì)菌的特點(diǎn)及其在瘤胃發(fā)酵中的作用11-12
  • 2.1.1 產(chǎn)甲烷菌的特點(diǎn)及其在瘤胃發(fā)酵中的作用11-12
  • 2.1.2 琥珀酸絲狀桿菌的特點(diǎn)及其在瘤胃發(fā)酵中的作用12
  • 2.1.3 黃色瘤胃球菌的特點(diǎn)及其在瘤胃發(fā)酵中的作用12
  • 2.2 真菌的特點(diǎn)及其在瘤胃發(fā)酵中的作用12-13
  • 2.3 瘤胃原蟲(chóng)的特點(diǎn)及其在瘤胃發(fā)酵中的作用13
  • 2.4 瘤胃微生物間的相互關(guān)系13-14
  • 3 瘤胃微生物的影響因素14-17
  • 3.1 年齡因素14-15
  • 3.2 動(dòng)物品種15
  • 3.3 飼料供給技術(shù)15-16
  • 3.4 采食水平16-17
  • 3.5 季節(jié)與地域影響17
  • 4 甲烷產(chǎn)量的影響因素及檢測(cè)方法17-23
  • 4.1 甲烷的產(chǎn)生機(jī)理17-18
  • 4.2 影響甲烷產(chǎn)量的因素18-19
  • 4.2.1 采食水平18
  • 4.2.2 碳水化合物類(lèi)型18
  • 4.2.3 飼料加工處理和貯存18-19
  • 4.2.4 脂肪的添加19
  • 4.2.5 離子載體19
  • 4.2.6 原蟲(chóng)19
  • 4.3 抑制甲烷產(chǎn)生的模式19-21
  • 4.3.1 抑制產(chǎn)H_2 和產(chǎn)CO_2 的細(xì)菌20
  • 4.3.2 直接對(duì)甲烷菌產(chǎn)生毒性20
  • 4.3.3 阻止甲烷合成的一些特殊反應(yīng)20
  • 4.3.4 提供電子釋放的新途徑20-21
  • 4.3.5 分解已經(jīng)產(chǎn)生的甲烷21
  • 4.4 甲烷產(chǎn)量的檢測(cè)21-23
  • 4.4.1 甲烷產(chǎn)量的估計(jì)21-22
  • 4.4.2 監(jiān)測(cè)反芻動(dòng)物甲烷排放量的方法22-23
  • 5 瘤胃微生物的定量研究方法23-27
  • 5.1 傳統(tǒng)定量方法23-25
  • 5.1.1 稀釋平板計(jì)數(shù)法24
  • 5.1.2 最大或然數(shù)法24-25
  • 5.2 分子生物學(xué)定量方法25-27
  • 5.2.1 點(diǎn)雜交和狹線(xiàn)雜交25
  • 5.2.2 變性(或溫度)梯度凝膠電泳25-26
  • 5.2.3 定量PCR 技術(shù)26-27
  • 6 研究目的、意義及主要內(nèi)容27-29
  • 第二章 瘤胃瘺管的設(shè)計(jì)與安裝29-34
  • 1 材料與方法29-32
  • 1.1 材料29
  • 1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物29
  • 1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器及藥品29
  • 1.2 方法29-32
  • 1.2.1 新型瘺管的設(shè)計(jì)(如圖1 所示)29-30
  • 1.2.2 術(shù)前準(zhǔn)備30-31
  • 1.2.3 手術(shù)31
  • 1.2.4 術(shù)后護(hù)理31-32
  • 1.2.5 術(shù)后觀察32
  • 2 結(jié)果與分析32-33
  • 2.1 麻醉效果32
  • 2.2 術(shù)后表現(xiàn)32-33
  • 3 結(jié)論33-34
  • 第三章 椰子油對(duì)不同日糧條件下綿羊瘤胃微生物的調(diào)控34-53
  • 1 材料與方法34-38
  • 1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及飼養(yǎng)管理34
  • 1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與試驗(yàn)方案34
  • 1.3 瘤胃液的采集34-35
  • 1.4 瘤胃微生物總DNA 的提取35-36
  • 1.4.1 生化試劑35
  • 1.4.2 主要儀器35-36
  • 1.4.3 主要分子生物試劑配制36
  • 1.4.4 瘤胃微生物DNA 的提取步驟36
  • 1.5 保存36-37
  • 1.6 瘤胃總 DNA 濃度的測(cè)定37
  • 1.7 Real Time-PCR 的定量37-38
  • 1.7.1 目標(biāo)菌種的監(jiān)測(cè)37-38
  • 1.7.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制作38
  • 2 結(jié)果與分析38-49
  • 2.1 添加椰子油對(duì)瘤胃微生物總濃度影響39
  • 2.2 Real-time PCR 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)39-43
  • 2.2.1 瘤胃甲烷菌(Ruminococcus methanogen)的Real-time PCR 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)39-40
  • 2.2.2 瘤胃真菌(Fungi) 的Real-time PCR 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)40-41
  • 2.2.3 黃色瘤胃球菌(Ruminococcus flavefaciens)的Real-time PCR 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)41-42
  • 2.2.4 琥珀酸絲狀桿菌(Fibrobacter succinogenes)的 Real-time PCR 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)42-43
  • 2.3 瘤胃微生物的定量分析43-47
  • 2.3.1 瘤胃甲烷菌(Ruminococcus methanogen)的Real-time PCR 定量分析43-44
  • 2.3.2 瘤胃真菌(Fungi) 的Real-time PCR 定量分析44-45
  • 2.3.3 黃色瘤胃球菌(Ruminococcus flavefaciens)的Real-time PCR 定量分析45-46
  • 2.3.4 琥珀酸絲狀桿菌(Fibrobacter succinogenes)的 Real-time PCR 定量分析46-47
  • 2.4 結(jié)果與分析47-49
  • 3 討論49-53
  • 第四章 飼糧中添加椰子油對(duì)綿羊瘤胃甲烷產(chǎn)量及發(fā)酵特性的影響53-61
  • 1 材料與方法53-59
  • 1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及飼養(yǎng)管理同第三章53
  • 1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與試驗(yàn)方案53
  • 1.3 瘤胃液的采集53
  • 1.4 測(cè)定項(xiàng)目及方法53-59
  • 1.4.1 瘤胃甲烷產(chǎn)量的監(jiān)測(cè)與調(diào)控53-56
  • 1.4.2 氨態(tài)氮(Ammonia-N)56-57
  • 1.4.3 揮發(fā)性脂肪酸(VFA)57-58
  • 1.4.4 pH58-59
  • 2 結(jié)果59
  • 3 討論59-61
  • 結(jié)論、創(chuàng)新點(diǎn)與后續(xù)研究展望61-62
  • 1 結(jié)論61
  • 2 創(chuàng)新點(diǎn)61
  • 3 后續(xù)研究展望61-62
  • 致謝62-63
  • 參考文獻(xiàn)63-69
  • 個(gè)人簡(jiǎn)介69-70
  • 導(dǎo)師簡(jiǎn)介70-71


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