牛標準乳的計算方法?

【專家解說】：中華人民共和國國家標準   生 鮮 牛 乳 收 購 標 準 GB 6914—86    Standards for the qualifications of raw and fresh milk received from farms 本標準適用于收購的生鮮牛乳的檢驗和評級。 1 定義 1.1 收購的生鮮牛乳:收購的生鮮牛乳系指從正常飼養(yǎng)的、無傳染病和乳房炎的健康母牛乳房內(nèi)擠出的常乳。 2 收購的生鮮牛乳的質(zhì)量要求 2.1 理化指標 理化指標只有合格指標,不再分級,見表1。                                         表 1項       目指      標脂 肪, ％                  ≥3.10蛋白質(zhì), ％　　　　　　　　 ≥2.95密度(20℃/4℃)　　　　　　 ≥1.0280酸度(以乳酸表示), ％　 　　≤0.162雜質(zhì)度, ppm　　　　　　　  ≤4汞, ppm　　　　　　　　　  ≤0.01六六六、滴滴涕，ppm 　　   ≤0.12.2 感官指標 正常牛乳應為乳白色或微帶黃色,不得含有肉眼可見的異物,不得有紅色、綠色或其他異色。不能有苦、咸、澀的滋味和飼料、青貯、霉等其他異常氣味。 2.3 細菌指標 收購牛乳細菌指標計有下列兩個,每個均可采用。采用平皿細菌總數(shù)計算法，按表2每毫升內(nèi)細菌總數(shù)分級指標進行評級;采用美藍還原褪色法按表8美藍褪色時間分級指標進行評級。兩者只許采用一個，不能重復。                                        表 2分級 , 級平皿細菌總數(shù)分級指標,萬個/mlⅠ≤50Ⅱ ≤100Ⅲ ≤200Ⅳ ≤400                              表 3分級 , 級美藍褪色時間分級指標Ⅰ≥ 4hⅡ  ≥ 2.5hⅢ  ≥ 1.5hⅣ   ≥ 40min 3 檢驗方法 3.1 乳的取樣法 3.1.1 適用范圍:本法記述從大型容器或小型容器中,取得具有代表性樣品的生乳及消毒乳取樣的方法。 3.1.2 規(guī)定:樣品的采取必須由公認的、具有一定技術(shù)的代理人進行。該代理人必須無傳染性疾病。樣品應附有負責取樣者簽名的報告書，該報告書應詳細記載取樣的場所、奶別、貨主、日期、時間、取樣者和到場者的姓名及職稱，必要時還應包括包裝形式、大氣溫度、濕度、取樣器具的滅菌方法、樣品防腐劑添加與否及有關的特殊情況。 3.1.3 各樣品必須貼上標簽并密封之,必要時還要寫明樣品的重量。樣品采取后必須在24h內(nèi),迅速送往試驗室進行檢驗。檢驗細菌的樣品采樣后應立即于4℃下冷藏,并于18h內(nèi)送到試驗室進行檢驗;如無冷藏設備,必須于采樣后2h內(nèi)進行檢驗。 3.1.4 化學分析用樣品采樣所用器具及樣品容器都必須清潔干燥。細菌檢驗用的取樣器具必須清潔滅菌,滅菌方法應根據(jù)不同材質(zhì)容器,采用不同滅菌法。 3.1.4.1 在170℃高溫熱氣中保持2h(能在無菌條件下放置更好)。 3.1.4.2 在120℃蒸氣(高壓鍋)中保持15～20min(能在無菌條件下放置更好)。 3.1.4.3 在100℃開水中浸泡1min(器具立即使用)。 3.1.4.4 在70％酒精中浸泡,使用之前再用火焰燒去酒精。 取樣容器以玻璃材料、不銹鋼和某些塑料制品為好，須配有合適的橡膠塞、塑料塞或螺旋塞蓋緊。使用橡膠塞時，須用不吸附的無臭物質(zhì)(例如某種塑料)套好蓋在容器上,也可用合適的塑料袋。 3.1.5 小型容器取樣,應該用密封完整的容器的內(nèi)容物作為樣品。化學分析的鮮乳樣品,可加適量對分析沒有影響的防腐劑,并在標簽和報告中注明。細菌和感官檢驗用的樣品不得使用防腐劑,但必須保存在0～5℃冷藏容器中,運輸途中也不可超過10℃,并須防止日光直射。 3.1.6 大容器取樣前,應上、下持續(xù)攪拌25次以上,直至充分混勻,然后直接用長柄匙取樣。 3.1.7 檢驗前,無論是理化質(zhì)量檢驗或衛(wèi)生質(zhì)量檢驗,所有生奶及消毒奶樣品由冷藏處取出后均須升溫至40℃,劇烈顛覆上下?lián)u蕩,使內(nèi)部脂肪完全融化并混合均勻后,再降溫至20℃,用吸管取樣進行檢驗。 3.2 乳中脂肪含量的測定 3.2.1 方法及處理 按照羅茲-格特里(Rose-Gettlieh)的乳脂肪測定法,將定量乳汁溶于含氨的酒精溶液中,用乙醚及石油醚將脂肪抽出,再蒸發(fā)去溶劑,稱量殘留物質(zhì)測定其中乳脂的重量。 3.2.2 試劑和溶液 3.2.2.1 氨水(GB 631—77)。 3.2.2.2 95％乙醇(GB 679—80)。  3.2.2.3 乙醚(HG 3—1002—76)和石油醚(HG 3—1003—76)1∶1混合溶液。 3.2.3 儀器和設備 3.2.3.1 化學天平:感量0.1mg。 3.2.3.2 抽出管:具有磨口玻璃塞、軟木塞或?qū)λ褂玫娜軇]有腐蝕污染的塞子。使用軟木塞時將良質(zhì)的軟木塞用乙醚繼而用石油醚進行處理，再將其放在60℃或60℃以上的熱水中至少浸泡20min以上,用水冷卻,這樣再使用時便飽和了。 3.2.3.3 燒瓶:250ml或150ml。 3.2.3.4 干燥箱：能調(diào)節(jié)到102±2℃使用。 3.2.3.5 電加熱板:配有安全裝置。 3.2.4 操作方法 3.2.4.1 樣品制備:參照3.1.7進行樣品處理,但搖蕩時不可過分強烈以至乳起泡和出現(xiàn)黃油脂肪攪乳。 3.2.4.2 空白試驗:在測定樣品脂肪含量時,用同型的抽出管,同量的試劑,以10ml蒸餾水進行空白試驗。該空白試驗值超過0.5mg時,檢查所用試劑,不純的要換。 3.2.4.3 將燒瓶置于干燥箱中加熱0.5～1h(在后面除去溶劑時用的浮石也一并放入),當燒瓶冷卻至天平室溫度時稱重。  3.2.4.4 立即將10～11g充分混合了的樣品置入抽出管中,在天平上直接稱重或稱其重量差。然后加入25％的氨溶液1.5ml或相應數(shù)量的已知更濃的氨溶液充分混合。在不加塞的容器里加入乙醇10ml，將其液體緩慢地、充分地混合，再加入乙醚25ml，將容器塞緊，用力搖蕩1～2min，冷卻。必要時可在流水中冷卻。小心取下塞子，加入石油醚25ml，搖蕩0.5～15min。將容器靜置約30min，至上層變得透明并與水層清晰地分離。取下塞子，用混合溶劑數(shù)毫升沖洗塞子及容器口部的內(nèi)壁， 所有沖洗液均注入容器中。仔細地用移液管或虹吸管盡可能多地將上層清液移入燒瓶中。 注：在不使用虹吸管移液操作時，為了便于傾倒，必須加入少量的水使兩層間的界面上升。 用混合溶劑數(shù)毫升沖洗容器口部的內(nèi)外壁或虹吸管前端的下部分。沖洗容器外壁的沖洗液流入燒瓶中，沖洗口部內(nèi)壁及虹吸管的沖洗液則流入抽出瓶中。 3.2.4.5 用15ml乙醚和15ml石油醚重復上述操作,進行第二次抽出。重復上述操作進行第三次抽出,唯略去最后的沖洗過程。 3.2.4.6 要注意盡可能地將溶劑(包含乙醇)蒸發(fā)或蒸餾去。在燒瓶容量小的時候，須用上述方法將抽出的各種溶劑先除去一部分。如果溶劑的氣味已經(jīng)消失，將燒瓶側(cè)放在干燥箱中加熱1h,然后冷卻至室溫,稱重,重復烘烤,直至恒重。如果抽出物中有不溶或有懷疑爭議時，重復加入石油醚并緩慢加溫搖動，將燒瓶中的脂肪完全抽出。此時，在傾倒前要使不溶物質(zhì)沉淀，燒瓶口的外壁沖洗三次。如前所述，將燒瓶橫放在干燥箱中加熱1h后,冷卻至天平室溫度,稱重,脂肪的重量,用3.2.4.6的重量與此次最后重量之差表示之。 3.2.5 計算 樣品的脂肪含量按式(1)計算。 F(％)＝ a/w× 100……………………………………(1) 式中: F——樣品的脂肪含量,％; a ——脂肪重量,g; W——樣品重量,g。 兩次平行測定結(jié)果之差,對于100g牛乳不超過0.03g。 3.3 乳汁中蛋白質(zhì)含量的測定 3.3.1 方法原理 用半微量凱氏定氮法,測定乳汁中氮的含量,從而計算出該乳汁中蛋白質(zhì)的含量(％)。 3.3.2 試劑和溶液 3.3.2.1 鹽酸(GB 622—77): 0.05N標準溶液。 3.3.2.2 氫氧化鈉(GB 629—81): 飽和溶液。 3.3.2.3 硼酸(GB 628—78): 2％溶液。 3.3.2.4 混合摧化劑:無水硫酸鉀或硫酸鈉、硫酸銅、硒按100:10:2的重量比配制而成。 3.3.2.5 混合指示液:以0.2％甲基紅與0.1％次甲基藍相等體積混合配成。 3.3.3 儀器和設備 3.3.3.1 電爐:1～2組附有支撐架的可調(diào)電爐。 3.3.3.2 凱氏燒瓶:250ml。 3.3.3.3 半微量凱氏定氮儀。 3.3.3.4 容量瓶:100ml。 3.3.4 操作 3.3.4.1 在干凈的凱氏燒瓶里,加入約2g催化劑,然后用10ml移液管吸取經(jīng)40℃升溫并冷卻至20℃左右的混合均勻的牛乳樣品10ml,稱重后直接注入凱氏燒瓶底部,再沿瓶壁徐徐加入15～20ml濃硫酸,并輕輕搖蕩,使樣品全部被硫酸脫水炭化。 3.3.4.2 將加好試劑的凱氏燒瓶放入通風櫥內(nèi)的可調(diào)電爐上,先小火加熱,至冒出白煙后加大火力,直至瓶內(nèi)溶液變成透明藍色后,再繼續(xù)加熱約20～30min即可。 3.3.4.3 將已冷卻的溶液移入100ml容量瓶內(nèi),并用蒸餾水重復沖洗凱氏燒瓶5～6次,全部沖洗液倒入容量瓶中,最后在液溫20℃時定容至100ml刻度線處。 3.3.4.4 蒸餾:吸取容量瓶內(nèi)樣品10ml放入半微量凱氏定氮儀的反應室內(nèi),加入約4ml飽和氫氧化鈉,放開蒸汽管夾,在通入的熱蒸汽作用下,樣品與飽和氫氧化鈉反應,放入NH3,經(jīng)冷卻管冷卻后流入盛有2％的硼酸溶液接受杯中,成為NH4HB4O7,使原來淡紫紅色的硼酸溶液(內(nèi)加有適量的混合指示劑)變?yōu)榈O果綠色,直至硼酸接受杯中溶液增加至約30ml時取下接受杯,同時用蒸餾水少許將冷卻管末端(浸入接受杯部分)殘余液滴沖洗入接受杯內(nèi)。 3.3.4.5 滴定:將接受杯內(nèi)液體用0.05N鹽酸標準溶液滴定,至出現(xiàn)淡紫紅色時為止,讀 出所消耗的鹽酸毫升數(shù)。 3.3.5 結(jié)果與計算        CP(％)＝( N×V×0.014×6.38/(W×(10/100)))× 100× 100……………………(2)    式中: CP——蛋白質(zhì)含量,％; N——鹽酸當量濃度; V——滴定消耗的鹽酸標準溶液的體積,ml; 0.014——1.0ml的一個當量鹽酸溶液相當于0.014g氮; 6.38——為將牛乳中氮的含量轉(zhuǎn)算為蛋白質(zhì)量的轉(zhuǎn)換值; W——牛乳樣品重,g。 3.4 乳汁密度的測定 3.4.1 儀器設備 溫度計:0～100℃; 牛奶密度計(乳稠計):20℃/4℃; 量筒:250ml、直徑大小應使在沉入乳稠計時，乳稠計的周邊和量筒內(nèi)壁間的距離不小于0.5cm。 3.4.2 操作 將牛乳樣品升溫至40℃,上下顛倒搖蕩,混合均勻后,降溫至20℃(10～25℃)左右,小心地注入高度大于密度計長度,容積約250ml的玻璃量筒中,加到量筒容積的3/4時為止。注入牛乳時應防止牛乳生成泡沫。放入乳稠計時，應手持乳稠計上部，小心地把它沉入量筒內(nèi)的乳汁中，讓它自由浮動，要使它不與量筒壁接觸。等乳稠計靜止2～3min后,雙眼對準筒內(nèi)乳液表面的高度。由于牛乳表面與乳稠計接觸處形成新月形，此新月形表面的頂點處乳稠計標尺的高度，即密度的數(shù)值。 3.4.3 結(jié)果的表示 所用的乳稠計要以20℃時的數(shù)值表示。因此，如果乳樣具有另一溫度，則須對溫度的差異加以校正。溫度以20℃每高出1℃時,要在得出的乳稠計度數(shù)上加0.2°,或在密度數(shù)值上加上0.0002;而溫度比20℃每低1℃時,要從得出的乳稠計度數(shù)上減0.2°,或在密度數(shù)值上減去0.0002。如遇到舊式密度計，標盡是在15℃/15℃時刻成的,須在15℃的同一溫度下測定和讀數(shù)。此密度數(shù)值，比在20℃時用20℃/4℃刻度的密度計測定牛乳所得的數(shù)值高0.002或較后一種密度計讀數(shù)高2°。 3.5 乳汁酸度的測定 3.5.1 試劑和溶液 3.5.1.1 95％乙醇(GB 679—80): 0.5％中性酚酞溶液。 3.5.1.2 氫氧化鈉(GB 629—81)(無碳酸鹽): 1/9N溶液。 3.5.1.3 冰乙酸(GB 676—78)。 3.5.1.4 乙酸玫瑰苯胺濃溶液:稱取0.12g乙酸玫瑰苯胺,逐漸加入95％乙醇(內(nèi)有0.5ml冰乙酸)50ml,再加入95％乙醇稀釋成100ml。 3.5.1.5 乙酸玫瑰苯胺稀溶液:吸取上述溶液1ml,用1:1蒸餾水稀釋過的95％乙醇溶液稀釋至500ml。上述兩種溶液應于陰暗處保存在棕色小口瓶中,用橡皮塞塞緊待用。 3.5.1.6 酚酞(HGB 3039—59): 0.5％中性溶液的配制,取1g酚酞溶于110ml95％乙醇中,加入80ml蒸餾水,再用約0.1N氫氧化鈉溶液一滴一滴的加入,直至溶液呈淡紅色為止,再加入蒸餾水稀至200ml即可。 3.5.2 儀器和設備 3.5.2.1 酸式滴定管、堿式滴定管：各10ml。 3.5.2.2 容量瓶:100ml、500ml。 3.5.3 操作 用吸管取兩份10ml牛乳,分別放入兩個50ml三角瓶中,其中一瓶加入1ml稀釋的乙酸玫瑰苯胺溶液作為顏色對照; 在另一瓶中加入1ml酚酞溶液,再由滴管中迅速加入1/9N氫氧化鈉溶液1ml,然后繼續(xù)逐滴加入,不停搖動,直至呈現(xiàn)的顏色與對照瓶內(nèi)淡品紅色相同時為止。全部滴定時間應當為20s左右。滴定工作最好能在白晝進行。如在夜晚進行須用熒光燈照明,如不用玫瑰苯胺顏色作對照,滴定終點可決定于奶樣呈現(xiàn)淡品紅色后,維持5s不褪即可。 3.5.4 結(jié)果的表示 每100ml牛乳內(nèi)含有乳酸克數(shù)＝滴定10ml牛乳時消耗1/9N氫氧化鈉溶液的毫升數(shù)÷10(乳酸克分子量設為90)。 也可用每100ml乳樣內(nèi)乳酸克數(shù)=奶樣酸度°T×0.009(0.009為乳酸換算系數(shù), 即1ml0.1N氫氧化鈉相當于0.009g乳酸)。 注:牛乳“°T”滴定法:取10ml待測的牛乳加20ml蒸餾水,再加入0.5％中性酚酞溶液1.5ml,用0.1N氫氧化鈉標準溶液滴定,直至溶液呈淡品紅色在30s內(nèi)不消失為止,消耗0.1N氫氧化鈉標準溶液的毫升數(shù)乘以10,即得酸度°T。兩次平行試驗結(jié)果差值不得大于0.5°T。 還可以用酒精試驗快速測定收購生乳的鮮度。酒精試驗方法是在試管內(nèi)用1～2ml中性酒精與牛乳等量混合,搖蕩后不出現(xiàn)絮片的乳樣即符合下列酸度標準,出現(xiàn)絮片的牛乳為酒精試驗陽性乳,表示其酸度高。試驗時溫度為20℃為標準。     酒粗濃度                  不出現(xiàn)絮片的酸度       68°                         20°T以下       70°                         19°T以下       72°                         18°T以下 3.6 乳汁雜質(zhì)度的測定 3.6.1 方法原理 取定量的牛乳樣通過一定大小口徑的棉質(zhì)過濾板過濾,用特制的含有不同雜質(zhì)沉淀量的各標準比色板與此過濾板的雜質(zhì)沉淀顏色相比可以測出該乳樣內(nèi)雜質(zhì)的濃度。 3.6.2 儀器和設備 3.6.2.1 棉質(zhì)過濾板:直徑32mm。 3.6.2.2 抽氣泵:368W。 3.6.2.3 標準比色板:直徑為28.6mm。 3.6.3 操作 取奶樣500ml,加熱至60℃,于棉質(zhì)過濾板上過濾,為了加快過濾速度,可用真空泵抽濾,用水沖洗粘附在過濾板上的牛乳。將過濾板置于烘箱中烘干后,再與標準比色板比較,即可得出過濾板上的雜質(zhì)量。 3.6.4 結(jié)果的表示 根據(jù)前述選出的與棉質(zhì)過濾板顏色最近似的標準比色板所代表的每500ml牛乳中含有的雜質(zhì)毫克數(shù),即可讀出乳樣每500ml中含有的雜質(zhì)毫克數(shù)。如以此數(shù)乘2,即可得出乳樣內(nèi)以ppm為單位的雜質(zhì)濃度,或每公斤含有雜質(zhì)的毫克數(shù)。 3.7 乳汁中汞的測定 乳汁中汞的測定按GB 5009.1～5009.70—85《食品衛(wèi)生檢驗方法 理化部分》中GB5009.17—85進行。 3.8 乳汁中六六六、滴滴涕殘留量的測定 乳汁中六六六、滴滴涕殘留量按照GB 5009.1～5009.70—85中GB 5009.19—85進行。 3.9 乳汁中細菌總數(shù)的測定 乳汁中細菌總數(shù)的測定按照GB 4789.1～4789.28—84《食品衛(wèi)生檢驗方法 微生物學部分》中GB 4789.2—84進行。 3.10 牛乳美藍還原褪色試驗 3.10.1 定義 本方法中所指牛乳衛(wèi)生質(zhì)量包括細菌的濃度和代謝強度以及體細胞代謝消耗一定量的所需要的時間。 3.10.2 方法原理 利用微生物及體細胞濃度愈大, 代謝愈旺盛, 單位時間內(nèi)消耗氧愈多, 美藍還原褪色時間相應變短; 反之, 美藍褪色時間則相應變長。在一定容量的牛乳內(nèi)加入定量的美藍,上覆少量消毒的液體石蠟以隔絕外界氧,在38℃水浴中靜置觀察美藍褪色時間的長短。 3.10.3 試劑 美蘭溶液的配制:稱取分析純美藍4.9ml,在100ml定容瓶內(nèi)加部分蒸餾水使之全部溶解后定容至100ml,塞上瓶蓋,于冰箱中貯存?zhèn)溆?使用期限為14日。 液體石蠟（分析純），使用前須蒸煮30min消毒。 3.10.4 儀器設備 分析天平: 感量0.1mg; 定溫浴槽(內(nèi)高不低于21cm); 試管: 18×1.8cm; 金屬試管架; 吸管: 1和20ml。 玻璃器皿使用前均須進行滅菌，吸管上端須放有脫脂棉以防操作時唾液進入樣品。 3.10.5 操作方法 用消毒吸管吸取每個待測乳樣20ml,分別放入順序排列在試管架上、編有代號的試管中，再在每個試管內(nèi)加入１ml美藍標準溶液，然后用一小張干凈硫酸紙蓋住管口，再用拇指壓緊，分別顛倒搖蕩混勻后，順序放在試管架上。在每個試管上部加入少許消毒液體石蠟封閉，然后將試管連同管架放入38℃恒溫浴槽中,應使槽中水面不低于試管內(nèi)乳樣高度。記錄開始時間,經(jīng)常注意觀察每支試管的顏色變化。當某一試管的顏色由藍變白(底部或表層余有少許藍色者也應算其褪色完畢)即算褪色完畢,記錄其褪色時間。 3.10.6 結(jié)果的表示 用小時和分鐘作為時間單位,表示每個樣品的美藍還原褪色時間。 附加說明: 本標準由中華人民共和國農(nóng)牧漁業(yè)部和衛(wèi)生部提出。 本標準由中國農(nóng)業(yè)科學院畜牧研究所負責起草。 本標準主要起草人王鵬。 自本標準實施之日起, GB 5408-85《消毒牛乳》中附錄A(補充件)"生鮮牛乳的一般技術(shù)要求”作廢。