甲烷氧化細(xì)菌(Methylosinus methanica)81Z中與甲醇氧化有關(guān)基因的克隆

【摘要】：以大腸桿菌(E.coli)DH-1菌株和考斯質(zhì)粒pLA 2917為宿主-載體系統(tǒng),建立了甲烷氧化細(xì)菌(Methylosinus methanica)81Z染色體基因文庫(kù)。甲醇利用菌(Methylobacterium organophilum)XX的甲醇脫氫酶(MDH)結(jié)構(gòu)基因片段(2.5kb)經(jīng)α-~(32)P標(biāo)記后作為探針對(duì)該文庫(kù)進(jìn)行篩選,得到兩個(gè)雜交陽(yáng)性重組質(zhì)粒,即pG5和pH11,其中pG5的插入片段為25.4kb,互補(bǔ)分析表明:pG5的插入片段能使包括MDH和細(xì)胞色素C(Cyt.c)基因突變株在內(nèi)的5株甲醇利用菌(Methylobacterium sp.)AM1的甲醇氧化阻滯突變株恢復(fù)在甲醇上的生長(zhǎng)能力,并且能使3株甲醇利用菌XX的甲醇氧化阻滯突變株恢復(fù)野生型生長(zhǎng)。至少有4個(gè)與甲醇氧化有關(guān)的基因位于該片段上。Southern blot雜交進(jìn)一步證實(shí):該插入片段與探針同源的區(qū)域在其4.8kb Sal Ⅰ片段內(nèi)。 【作者單位】： 中國(guó)科學(xué)院成都生物研究所;Gray
【關(guān)鍵詞】： 甲烷氧化細(xì)菌 甲醇氧化 基因克隆
【正文快照】： 甲烷氧化細(xì)菌812是從沼氣發(fā)生器中分離到的一株11型專(zhuān)性甲烷氧化細(xì)菌田。該菌純培養(yǎng)物具有這類(lèi)菌的基本特征:以甲烷為生長(zhǎng)的唯一碳源和能源,嚴(yán)格好氧。它能夠在沼氣發(fā)生器這種厭氧環(huán)境中生存,可能具有一套特殊的代謝調(diào)節(jié)系統(tǒng)。對(duì)它的C:代謝有關(guān)基因及其調(diào)節(jié)機(jī)理的研究,有助于

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