誰能講講植物組織培養(yǎng)的具體步驟

熱心網(wǎng)友： 哪個(gè)部分都可以，根塊莖部大概比較方便 選用液態(tài)培養(yǎng)基 要經(jīng)常更換培養(yǎng)基 注意消毒，殺菌

熱心網(wǎng)友：植物組織培養(yǎng)步驟一、培養(yǎng)材料的采集 組織培養(yǎng)所用的材料非常廣泛，可采取根、睫、葉、花、芽和種子的子葉，有時(shí)也利用花粉粒和花藥，其中根尖不易滅菌，一般很少采用。 對于木本花卉來說，闊葉樹可在一、二年生的枝條上采集，針葉樹種多采種子內(nèi)的子葉或胚軸，草本植物多采集睫尖。 在快速繁殖中，最常用的培養(yǎng)材料是睫尖，通常切塊在0.5厘米左右，如果為培養(yǎng)無病毒苗而采用的培養(yǎng)材料通常僅取睫尖的分生組織部分，其長度在0.1毫米以下。這里使用馬鈴薯 二、培養(yǎng)材料的消毒 （一）先將材料用流水沖洗干淨(jìng)，最後一遍用蒸餾水沖洗，再用無菌紗布或吸水紙將材料上的水分吸干，並用消毒刀片切成小塊。 （二）在無菌壞境中將材料放入70％灑精中浸泡30－60秒。 （三）再將材料移入漂白粉的飽和液或0.01％升汞水中消毒10分鐘。 （四）取出後用無菌水沖洗三、四次。 三、制備外植體 將已消毒的材料，用無菌刀、剪、鑷等，在無菌的環(huán)境下，剝?nèi)パ康镊[片、嫩枝的外皮和種皮胚乳等，葉片則不需剝皮。然後切成0.2－0.5厘米厚的小片，這就是外植體。在操作中嚴(yán)禁用手觸動材料。 四、接種和培養(yǎng) （一）接種　 　　在無菌壞境下，將切好的外植體立即接在培養(yǎng)基上，每瓶接種4－10個(gè)。 （二）封口　 　　接種後，瓶、管用無菌藥棉或賓噸f，培養(yǎng)皿用無菌膠帶封口。 （三）溫度　 　　培養(yǎng)基大多應(yīng)保持在25℃左右，但要因花卉種類及材料部位的不同而區(qū)別對待。 （四）增殖　 外植體的增殖是組培的關(guān)鍵階段，在新梢等形成後為了擴(kuò)大繁殖系數(shù)，需要繼代培養(yǎng)。把材料分株或切段轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基中，增殖培養(yǎng)基一般在分化培養(yǎng)基上加以改良，以利于增殖率的提高。增殖1個(gè)月左右後，可視情況進(jìn)行再增殖。 （五）根的誘導(dǎo)　 繼代培養(yǎng)形成的不定芽和側(cè)芽等一般沒有根，必須轉(zhuǎn)到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)。1個(gè)月後即可獲得鍵壯根系。 五、組培苗的練苗移栽 試管苗從無菌到光、溫、濕穩(wěn)定的環(huán)境進(jìn)入自然環(huán)境，必須進(jìn)行煉苗。一般移植前，先將培養(yǎng)容器打開，于室內(nèi)自然光照下放3天，然後取出小苗，用自來水把根系上的營養(yǎng)基沖洗干淨(jìng)，再栽入已準(zhǔn)備好的基質(zhì)中，基質(zhì)使用前最好消毒。移栽前要適當(dāng)遮蔭，加強(qiáng)水分管理，保持較高的空氣濕度（相對濕度98％左右），但基質(zhì)不宜過濕，以防爛苗。

熱心網(wǎng)友：把它切成塊，用土埋。明年就長出來了

熱心網(wǎng)友：植物組織培養(yǎng)材料和方法 植物組織培養(yǎng)材料和方法 從低等的藻類到苔蘚、蕨類、種子植物等高等植物的各類、各部分都可采用作為組織培養(yǎng)的材料，一般裸子植物多采用幼苗、芽、韌皮部細(xì)胞，被子植物采用胚、胚乳、子葉、幼苗、莖尖、根、莖、葉、花藥、花粉、子房和胚珠等各個(gè)部分?！　∮捎谥参镌谧匀粭l件下，表面常被霉菌和細(xì)菌污染，故材料必須進(jìn)行滅菌處理。一般用漂白粉溶液（1～10％）、次氯酸鈉溶液（0．5～10％）、升汞溶液（0．01％）、乙醇（70％）或過氧化氫（3～10％）等處理后，再用無菌水反復(fù)沖洗至凈，然后在無菌室內(nèi)，將所取的組織迅速培養(yǎng)在固體培養(yǎng)基上。在適宜的條件下，受傷組織切口表面不久即能長出一種脫分化的組織堆塊，稱為愈傷組織（Callus），此種愈傷組織在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上經(jīng)一定時(shí)間即能誘導(dǎo)生長成整株植物，因此愈傷組織既可是某種植物代謝產(chǎn)物的來源，又是誘導(dǎo)成株的主要途徑之一?！　≡谶m宜的培養(yǎng)條件下，還可使愈傷組織長期傳代生存下去，這種培養(yǎng)稱為繼代培養(yǎng)。但在繼代培養(yǎng)中，不少植物培養(yǎng)的組織或細(xì)胞隨著再培養(yǎng)代數(shù)的增加，分化能力就逐漸降低甚至喪失，其原因可能是由于在培養(yǎng)過程中原有母體中存在的、與器官形成有關(guān)的特殊物質(zhì)被逐漸消耗所致，因此可以用激素或改善營養(yǎng)條件使之恢復(fù)，也有認(rèn)為是組織和細(xì)胞在長期培養(yǎng)中遺傳往的改變，主要是染色體的變化，出現(xiàn)大量多倍性或非整倍性細(xì)胞，這種改變恢復(fù)的可能住較小。不同的培養(yǎng)基可以使愈傷組織具有不同的生長速度，結(jié)構(gòu)也可松可緊，利用這些特性可使之分散成為單細(xì)胞或很小的細(xì)胞團(tuán)。要形成單細(xì)胞培養(yǎng)宜在較高鹽分、高生長素及高水解酪蛋白的培養(yǎng)基中進(jìn)行，然后移入液體并經(jīng)攪拌而分散成單細(xì)胞。也有用加入一些果膠酶的辦法，但一般來說要得到純一的單細(xì)胞是很少的?！　≡谂囵B(yǎng)藥用植物選材時(shí)，還應(yīng)考慮到所需要的次生物質(zhì)在植物體中的合成部位，如果選材和培養(yǎng)方法適當(dāng)，可使原植物內(nèi)所產(chǎn)主的代謝物通過細(xì)胞或組織培養(yǎng)發(fā)生生化轉(zhuǎn)變而獲得。　　通過組織培養(yǎng)可獲得有效成分，但實(shí)際上只有大量培養(yǎng)成功才有經(jīng)濟(jì)價(jià)值。因此在生產(chǎn)上常采用懸浮培養(yǎng)法來代替含有瓊脂的固體培養(yǎng)基。愈傷組織懸浮培養(yǎng)的生長通常比靜止培養(yǎng)快，這是由于懸浮培養(yǎng)時(shí)營養(yǎng)成分可較快地滲入細(xì)胞，抑制生長的代謝廢物可較快地除去，同時(shí)供氧情況也較好，在進(jìn)行這種培養(yǎng)時(shí)要注意通氣與定期更新營養(yǎng)液，這是保證生長穩(wěn)定，次生物質(zhì)產(chǎn)量高的關(guān)鍵之一。

熱心網(wǎng)友：馬鈴薯培養(yǎng)基　　馬鈴薯 20g　　蔗糖 2g　　自來水 100mL　　瓊脂 2g　　pH 自然（約6.0）　　滅菌 1.05kg/cm2，20min　　馬鈴薯處理方法:　　馬鈴薯去皮，切成塊加水，煮沸30min（注意火力的控制，可適當(dāng)補(bǔ)水） ，用紗布過濾，濾液加糖，補(bǔ)足水至100ml，裝入三角瓶。

熱心網(wǎng)友：植物組織培養(yǎng)的大致過程是：在無菌條件下，將植物器官或組織（如芽、莖尖、根尖或花藥）的一部分切下來，放在適當(dāng)?shù)娜斯づ囵B(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，這些器官或組織就會進(jìn)行細(xì)胞分裂，形成新的組織。不過這種組織沒有發(fā)生分化，只是一團(tuán)薄壁細(xì)胞，叫做愈傷組織。再適合的光照、溫度和一定的營養(yǎng)物質(zhì)與激素等條件下，愈傷組織便開始分化，產(chǎn)生出植物的各種器官和組織，進(jìn)而發(fā)育成一棵完整的植株。 植物組織培養(yǎng)即植物無菌培養(yǎng)技術(shù)，是根據(jù)植物細(xì)胞具有全能性的理論，利用植物體離體的器官如根、莖、葉、莖尖、花、果實(shí)等）組織（如形成層、表皮、皮層、髓部細(xì)胞、胚乳等）或細(xì)胞（如大孢子、小孢子、體細(xì)胞等）以及原生質(zhì)體,在無菌和適宜的人工培養(yǎng)基及光照、溫度等人工條件下，能誘導(dǎo)出愈傷組織、不定芽、不定根，最后形成完整的植株的學(xué)科 補(bǔ)充: Plant tissue culture（植物組織培養(yǎng)）： 〈廣義〉又叫離體培養(yǎng)，指從植物體分離出符合需要的組織.器官或細(xì)胞，原生質(zhì)體等，通過無菌操作，在人工控制條件下進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。 〈狹義〉組培指用植物各部分組織，如形成層.薄壁組織.葉肉組織.胚乳等進(jìn)行培養(yǎng)獲得再生植株，也指在培養(yǎng)過程中從各器官上產(chǎn)生愈傷組織的培養(yǎng)，愈傷組織再經(jīng)過再分化形成再生植物。 植物組織培養(yǎng)步驟 第一步，將采來的植物材料除去不用的部分，將需要的部分仔細(xì)洗干凈，如用適當(dāng)?shù)乃⒆拥人⑾?。把材料切割成適當(dāng)大小，即滅菌容器能放人為宜。置自來水龍頭下流水沖洗幾分鐘至數(shù)小時(shí)，沖洗時(shí)間視材料清潔程度而宜。易漂浮或細(xì)小的材料，可裝入紗布袋內(nèi)沖洗。流水沖洗在污染嚴(yán)重時(shí)特別有用。洗時(shí)可加入洗衣粉清洗，然后再用自來水沖凈洗衣粉水。洗衣粉可除去輕度附著在植物表面的污物，除去脂質(zhì)性的物質(zhì)，便于滅菌液的直接接觸。當(dāng)然，最理想的清洗物質(zhì)是表面活性物質(zhì)—吐溫。 第二步是對材料的表面浸潤滅菌。要在超凈臺或接種箱內(nèi)完成，準(zhǔn)備好消毒的燒杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、無菌水、手表等。用70%酒精浸10～30秒。由于酒精具有使植物材料表面被浸濕的作用，加之70%酒精穿透力強(qiáng)，也很易殺傷植物細(xì)胞，所以浸潤時(shí)間不能過長。有一些特殊的材料，如果實(shí)、花蕾、包有苞片、苞葉等的孕穗，多層鱗片的休眠芽等等，以及主要取用內(nèi)部的材料，則可只用70%酒精處理稍長的時(shí)間。處理完的材料在無菌條件下，待酒精蒸發(fā)后再剝除外層，取用內(nèi)部材料。 第三步是用滅菌劑處理。表面滅菌劑的種類較多，可根據(jù)情況選取1—2種使用見表。第四步是用無菌水涮洗，涮洗要每次3min左右，視采用的消毒液種類，涮洗3-l0次左右。無菌水涮洗作用是免除消毒劑殺傷植物細(xì)胞的副作用注意：①酒精滲透性強(qiáng)，幼嫩材料易在酒精中失綠，所以浸泡時(shí)間要短，防止酒精殺死植物細(xì)胞。②老熟材料，特別是種子等可以在酒精中浸泡時(shí)間長一些，如種子可以浸泡5分鐘。③升汞的滲透力弱，一般浸泡10分鐘左右，對植物材料的殺傷力不大。④漂白粉容易導(dǎo)致植物材料失綠，所以對于幼嫩材料要慎用。⑤在消毒液中加入濃度為0.08—0.12%的吐溫20或80（一種濕潤劑），可以降低植物材料表面的張力，達(dá)到更好的消毒效果。

熱心網(wǎng)友：植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用 快速繁殖優(yōu)良植物株系　　組織培養(yǎng)具有時(shí)間短、增殖率高和全年生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)，比大田生產(chǎn)快得多。加上培養(yǎng)材料和試管苗的小型化，這就可使有限的空間培養(yǎng)出大量個(gè)體。例如蘭花（Cymbidium）、桉樹（Eucalyptus）、楊樹、秋海棠等植物，用一個(gè)莖尖或一小塊葉片為基數(shù)，經(jīng)過組織培養(yǎng)，一年內(nèi)可以增殖到10000～100000株，繁殖速度如此快，說明組織培養(yǎng)對于短期內(nèi)需要大量繁殖的植物，如引入的優(yōu)良品種、優(yōu)良單株、育種過程中優(yōu)良子代的擴(kuò)大等，特別有用，而且對一些難以繁殖或繁殖很慢的名貴花卉、果木及稀有植物，同樣具有重要意義。 培育作物新品種　　用組織培養(yǎng)方法培育作物新品種，已經(jīng)取得了多方面的成就。例如利用組織培養(yǎng)解決雜交育種中的種胚敗育問題，獲得了雜種子代，使遠(yuǎn)緣雜交得以成功；用花藥培養(yǎng)和對未傳粉的子房進(jìn)行離體培養(yǎng)，獲得了單倍體植株，從而開辟了單倍體育種的途徑；通過胚乳離體培養(yǎng)，獲得了三倍體植株，為改良農(nóng)、林、果樹和蔬菜的三倍體育種提供了新的方法；此外還有利用原生質(zhì)體培養(yǎng)及體細(xì)胞雜交進(jìn)行天然突變系的篩選、外源遺傳物質(zhì)的導(dǎo)入等等。 獲得無病植株　　作物的病毒病害，是當(dāng)前農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的嚴(yán)重問題。尤其是營養(yǎng)繁殖的作物，病毒可以經(jīng)繁殖用的營養(yǎng)器官傳至下一代，以致隨著作物繁殖代數(shù)的積累，病毒不僅綿延不絕，還會日益增多。其結(jié)果能使作物退化減產(chǎn)，甚至導(dǎo)致某些品種絕滅?！　「鶕?jù)病毒在植物體內(nèi)分布并不均勻的特點(diǎn)，用生長點(diǎn)進(jìn)行組織培養(yǎng)，結(jié)合病毒鑒定，可以得到無病毒植株。這就可以使植株復(fù)壯，并能增加產(chǎn)量。在這方面，馬鈴薯（Solanum tuberosumL.）、水仙（Narcissus tazatia L. var. chinensis Roem）、蘋果、梨（Pyrus）和花椰菜（Brassica oleracea var.bo-trytis L.）等作物，都取得了明顯效果。 保存和運(yùn)輸種質(zhì)　　由于有了組織培養(yǎng)方法，就無需再用一代代保存種子的方法去保存種質(zhì)資源，而可以將植物器官、組織甚至細(xì)胞，在低溫或超低溫條件下進(jìn)行長期保存。將來一旦需要，就可用組織培養(yǎng)方法迅速進(jìn)行繁殖。這樣不但大大減少了一代代保存材料所浪費(fèi)的人力、物力和時(shí)間，而且也減少了在保存過程中因管理不善及病蟲侵害所造成的損失。另外，由于用很小的空間保存了大量的種質(zhì)資源，運(yùn)輸時(shí)也很方便。

熱心網(wǎng)友：先把種子放在適宜的土壤中，常常澆水。

熱心網(wǎng)友：把馬鈴薯打碎，取得里面的淀粉，經(jīng)過多層紗布過濾，即可作為培養(yǎng)基使用。

熱心網(wǎng)友：中國農(nóng)業(yè)出版社出版的《花卉組織培養(yǎng)》里面寫的非常詳細(xì)，連無土栽培的配方都有，自己去看看吧！

熱心網(wǎng)友：不用吧，種植土豆還用培養(yǎng)基，小時(shí)候光種那東西了。取一個(gè)土豆，當(dāng)然，要選好的優(yōu)良種子，然后就可以分割它做種，這個(gè)步驟很關(guān)鍵，可以分成很多塊，也可以分成二塊，但前提必須是每塊上面都有芽，就是土豆上面的小坑兒。它就是土豆的胚胎，呵。這個(gè)小原理都知道，沒有胚胎，植物是不會生長的。割好種子后，埋進(jìn)土里就OK了。還有一些小細(xì)節(jié)，種子不要埋得太淺，因?yàn)榕嘛L(fēng)吹走上面的土壤，露出種子，它就會變成青色的，無法食用。當(dāng)然有條件一定要施些肥料。會生長得很好，沒有也無所謂了。兩株之是的距離不能太近。待生長出秧子后，要以常備壟。呵，這都是農(nóng)家的話了。如果雨水多，土豆就不會面，反之，就會很面，口感極佳。它一般不生蟲子。但它可是那些散放動物的最愛。別的沒啥了，就這樣簡單！回答得不好，見諒了！