微生物實驗室常用物品采用的滅菌方法

【專家解說】：一、物理消毒滅菌法 物理消毒滅菌法是醫(yī)學(xué)實踐中常用的方法，通常包括熱力、紫外線、輻射、超聲波和濾過除菌等。 (一)熱力滅菌法 熱力能破壞微生物的蛋白質(zhì)和核酸，使蛋白質(zhì)變性凝固，核酸解鏈崩裂，從而導(dǎo)致其死亡。 1.干熱滅菌法 常用焚燒、燒灼和干烤等方法。 (1)焚燒與燒灼 焚燒僅用于廢棄的被病原微生物污染的物品、垃圾、人及動物尸體等。燒灼用于微生物實驗室的接種環(huán)、金屬器械、試管口、瓶口等的滅菌。 (2)干烤 使用干烤箱滅菌，一般需加熱至160℃～170℃經(jīng)2h，可達到滅菌的目的。適用于玻璃器皿、瓷器、金屬物品等的滅菌。 2.濕熱消毒滅菌法 (1)巴氏消毒法 法國學(xué)者巴斯德創(chuàng)用而得名。主要以較低溫度殺滅病原菌或特定微生物，而使物品中不耐熱成分不被破壞。此法有兩種：一種方法是加熱61.1℃～62.8℃、30min；另一種方法是加熱71.7℃、15～30s?，F(xiàn)在人們多用后種方法對牛奶進行消毒。 (2)煮沸法 煮沸100℃、5～10min，可殺死細菌繁殖體。芽胞則需要煮沸1～2h。常用于注射器、食具與飲水的消毒。 (3)流通蒸氣法 用阿諾(Arnold)蒸鍋或普通蒸籠，加熱100℃、15～30min，可殺滅細菌的繁殖體。若將消毒后的物品放入37℃孵箱培養(yǎng)，使芽胞發(fā)育成繁殖體，次日再蒸一次，如此連續(xù)三次以上，可達到滅菌效果，這種方法稱為間歇滅菌法。常用于不耐高溫的物品，如糖類、血清和雞蛋培養(yǎng)基等的滅菌。 (4)高壓蒸氣滅菌法 是一種迅速而有效的滅菌方法。使用高壓蒸氣滅菌器，利用加熱產(chǎn)生蒸氣，隨著蒸氣壓力不斷增加，溫度隨之升高，通常壓力在103.4kPa(相當(dāng)舊制的15磅/吋 2 或1.05kg/cm 2 )時，器內(nèi)溫度可達121.3℃，維持15～30min，可殺滅包括芽胞在內(nèi)的所有微生物。此法常用于一般培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)器械及敷料等耐濕和耐高溫物品的滅菌。 (二)紫外線與電離輻射 1.日光與紫外線 日光消毒是最簡單、經(jīng)濟的方法，將病人的被褥、衣服、書報等在日光下曝曬數(shù)小時，可殺死表面的大部分微生物。日光中殺菌的成份主要是紫外線。紫外線200～300nm時，具有殺菌作用，其中以265～266nm波長的紫外線殺菌力最強。紫外線的殺菌原理，主要是細菌DNA吸收紫外線后，一條鏈上相鄰的兩個嘧啶通過共價鍵結(jié)合形成二聚體，從而干擾了DNA的正常堿基配對，導(dǎo)致細菌死亡或變異。 紫紅外線能透過石英，但不能穿過一般玻璃或薄紙，因此，紫外線只適用于物體表面及空氣的消毒。例如手術(shù)室、嬰兒室、傳染病房、無菌制劑室、微生物接種室的空氣消毒。 2.電離輻射 X射線、γ射線和陰極射線等電離輻射，有較高的能量與穿透力，因而可產(chǎn)生較強的致死效應(yīng)。其機制在于產(chǎn)生游離基，破壞DNA。此法常用于大量一次性醫(yī)用塑料制品的消毒；亦可用于中藥成藥和食品的消毒，而不破壞其化學(xué)成分和營養(yǎng)成分。 (三)超聲波 超聲波是不被人耳感受的高于 20千周/s的聲波。其殺菌機制主要是它通過水時發(fā)生空化作用，而破壞了細菌細胞質(zhì)的膠體狀體，使其胞膜、胞質(zhì)分離，胞壁及胞膜破碎致細菌繁殖體死亡。此法主要用于粉碎細胞，以提取細胞組分或制備抗原等。 (四)微波 是一種波長為 1mm到1m左右的電磁波，稱微波。它能穿透玻璃、塑料薄膜與陶瓷等物質(zhì)，但不能穿透金屬表面。目前用于消毒的微波有2,450MHz與915MHz兩種，常用于檢驗室用品、非金屬器械、無菌病室的食品用具及其它用品的消毒。 (五)濾過除菌 濾過除菌是用濾菌器阻留過濾液體和氣體的細菌，以達到無菌的目的。濾菌器含有微細小孔，只允許液體或氣體通過，而大于孔徑的細菌等顆粒不能通過。常用濾菌器有蔡氏濾器、玻璃濾器、薄膜濾器及高效顆?？諝鉃V器四種。主要用于不耐熱的血清、抗毒素、生物藥品以及空氣等的除菌。 二、化學(xué)消毒法 許多化學(xué)藥物都有抑制或殺滅微生物作用，按作用不同分為化學(xué)消毒劑和化學(xué)治療劑兩類，用于消毒、防腐和治療疾病。 (一)常用消毒劑的種類和應(yīng)用 具有殺死微生物的化學(xué)藥物稱消毒劑。消毒劑對人體有毒性作用，只能外用，不能內(nèi)服。主要用于皮膚粘膜的傷口、器械、排泄物和周圍環(huán)境的消毒。消毒劑在低濃度時也可作防腐用，但防腐劑的關(guān)鍵是應(yīng)要對人體無毒性作用。消毒劑種類濃度與用途見表 13-1。 表 13-1 常用消毒劑的種類濃度與用途 類別 名稱 濃度 用途 重金屬鹽類 紅汞 2% 皮膚粘膜的小創(chuàng)傷消毒 升汞 0.05%～0.1% 非金屬器皿浸泡消毒 硝酸銀 1% 新生兒滴眼防淋球菌感染 氧化劑 高錳酸鉀 0.1% 皮膚粘膜消毒 過氧化氫 3% 皮膚粘膜創(chuàng)口消毒 過氧乙酸 0.2%～0.5% 塑料、玻璃器材消毒 碘酒 2.0%～2.5% 皮膚消毒 氯 0.2ppm～0.5ppm 飲水及游泳池消毒 漂白粉 10%～20% 地面、廁所與排泄物消毒 醇類 乙醇 70%～75% 皮膚、體溫表消毒 酚類 石碳酸 3%～5% 地面、器具表面的消毒 來蘇 2% 皮膚消毒 醛類 甲醛 10% 物品表面、空氣消毒 戊二醛 2% 精密儀器、內(nèi)窺鏡消毒 表面活性劑 新潔爾滅 0.05%～0.1% 皮膚粘膜、器械消毒 杜滅芬 0.05%～0.1% 皮膚創(chuàng)傷沖洗、金屬器械、塑料、橡皮類消毒 染料 龍膽紫 2%～4% 淺表創(chuàng)傷消毒 酸堿類 醋酸 500mml/100m 3 加等量水蒸發(fā) 空氣消毒 食醋 2%溶液， 3～5ml/m 3 熏蒸消毒空氣 生石灰 加水 1：4 或 1：8 配成糊狀 排泄物及地面消毒