關(guān)于花粉的實(shí)驗(yàn)

【專家解說】：實(shí)驗(yàn)題目：花粉活力的測(cè)定 教師：XXX 實(shí)驗(yàn)類型：基礎(chǔ) 學(xué)時(shí)：4(參考) 內(nèi) 容： 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1.學(xué)習(xí)用碘-碘化鉀染色測(cè)定法測(cè)定花粉活力，了解可育和不育花粉的形態(tài)、生理特征。 2.學(xué)習(xí)用過氧化物酶測(cè)定法測(cè)定花粉活力，了解可育和不育花粉的形態(tài)、生理特征。 3.學(xué)習(xí)用氯化三苯基四氮唑法測(cè)定花粉活力，了解可育和不育花粉的形態(tài)、生理特征。 二、實(shí)驗(yàn)原理 （一）碘一碘化鉀染色測(cè)定法 水稻正常花粉呈圓球形，并積累淀粉較多，通常可用I-KI染成藍(lán)色；發(fā)育不良的花粉常呈畸形，不積累淀粉，用I-KI染色，不呈藍(lán)色，而呈黃褐色。 （二）過氧化物酶測(cè)定法 具有生活力的花粉含有活躍的過氧化物酶。此酶能利用過氧化氫使各種多酚及芳香族胺發(fā)生氧化而產(chǎn)生顏色，依據(jù)顏色可知花粉有無活性。 （三）氯化三苯基四氮唑法(TTC法) 2、3、5-氯化三苯基四氮唑(TTC)的氧化狀態(tài)是無色的，被氫還原時(shí)成紅色的TTF。 具有生命力的種子，由于呼吸作用產(chǎn)生的氫能使TTC還原成TTF，因此胚部便染成紅色；而無生命的種子沒有呼吸代謝活力，TTC不被還原，因而胚部不著色。所以，可根據(jù)種子胚部染不染成紅色來判斷種子有無生命力，從而測(cè)定種子發(fā)芽率。 三、試劑與器材 1. 材料:水稻花粉 2. 試劑: (1)I-KI溶液 (2) 0.5％聯(lián)苯胺：將0.5g聯(lián)苯胺溶于100m150％乙醇中。 (3)0.5％a一萘酚：將0.5ga一萘酚溶于100ml 50％乙醇中。 (4)0.25％碳酸鈉：將0.25g碳酸鈉溶于100ml蒸餾水中。 (5)0.3％過氧化氫，即試劑Ⅱ。 (6)試劑I：由0.5％聯(lián)苯胺、0.5％a一萘酚和0.25％碳酸鈉溶液各10ml混合配成。 (7)0.5％TTC溶液。 3.器材：顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、恒溫箱。 四、操作方法 1.花粉采集、置載玻片上、滴加試劑 2.鏡檢、觀察 3.計(jì)算 五、關(guān)鍵步驟與注意事項(xiàng) 1、四氮唑液最好現(xiàn)配現(xiàn)用，如要貯存必須放在棕色瓶中，并放在陰涼黑暗處。 2、花粉采集時(shí)期要適宜，取充分成熟將要開花的花朵帶回室內(nèi)，取其內(nèi)部的花粉。