葉綠素提取中，其原理的詳細(xì)解答，詳細(xì)的呀！

【專家解說】：一、目的 學(xué)會(huì)葉綠體色素提取和分離的方法，了解葉綠體色素的性質(zhì)。 二、材料用具及儀器藥品（1） 層析液配方：石油醚20ml+丙酮2ml+苯1ml（2）天平、研缽、燒杯、量筒、濾紙、表面皿、剪刀、90-95%乙醇、汽油、漏斗、滴管（3）菠菜、木茨等葉子 三、原理葉綠體含有葉綠體色素，葉綠體色素主要包括有Chla、Chlb、葉黃素和胡蘿卜素，可用有機(jī)溶劑乙醇、丙酮等將它們提取出來。紙層析法是分離葉綠體色素最簡單的方法。它的原理是利用混合色素中各個(gè)成分物理、化學(xué)性質(zhì)的差別，分別以不同程度分布于兩相中（即固定相和流動(dòng)相）。由于它們以不同的速度移動(dòng)，從而達(dá)到分離的目的。 葉綠體色素容易受光的破壞，變成褐色。葉綠體色素具有熒光現(xiàn)象。葉綠素分子的鎂可被銅替代，形成銅代葉綠素。葉綠體色素對(duì)不同波長的光具有吸收作用。 四、方法 1、紙層析法分離葉綠體色素（方法1）（1） 稱取新鮮葉片（木茨、菜心、菠菜等葉均可）1克，剪碎，放在研缽中，加乙醇5m1，共研磨成勻漿，靜置5分鐘。（2） 用滴管吸取上面的色素提取液4～5滴。一滴一滴地滴在濾紙的中央（濾紙要平放在表面皿或培養(yǎng)皿上）。待色素點(diǎn)風(fēng)干后，向該色素點(diǎn)上慢慢滴加汽油，使四種色素（葉綠素a、葉綠素b、葉黃素、胡蘿卜素）在濾紙上分離出來，四種色素在濾紙上的移動(dòng)速度是胡蘿卜素（橙黃色）>葉黃素（黃色）>葉綠素a(藍(lán)綠色)>葉綠素b（黃綠色）。 2、紙層析法分離葉綠體色素（方法2） （1） 稱2克新鮮綠色葉片，剪碎，放在研缽中，加入5ml乙醇，共研磨成勻漿，過濾，該濾液即為色素提取液。（2）取一塊預(yù)先干燥處理過的定性濾紙，將它剪成長約10cm ，寬約1cm的濾紙條。（3）用毛細(xì)管吸取色素提取液。在濾紙條的一端（約距這一端的1cm處）劃出一條濾液細(xì)線，等濾液干燥后，再重復(fù)劃4～5次。（4）將濾紙條的另一端（約距這一端1cm處）拆成“V”字形，并將它掛在放有層析液的燒杯壁上（注意：色素線要略高于層析液面，且濾紙條下端最好不要碰到燒杯壁），蓋上培養(yǎng)皿。（5）經(jīng)幾分鐘后，觀察色素帶的分布，最上端為胡蘿卜素，其次是葉黃素，再次是葉綠素a，最后是葉綠素b。3、葉綠體色素的性質(zhì)鑒定（1）葉綠體色素的提取取菠菜（或其他植物）葉子2g，加石英砂和碳酸鈣少許，乙醇約5ml，研磨成勻漿，再加乙醇15ml，用漏斗過濾，即為色素提取液。（2）葉綠素的熒光現(xiàn)象取上述色素乙醇提取液少許于試管中，在反射光和透射光下觀察色素提取液的顏色有什么不同。反射光下觀察到的溶液顏色，即為葉綠素產(chǎn)生的熒光現(xiàn)象。（3）光對(duì)葉綠素的破壞作用取上述色素乙醇提取液少許，分裝在2支試管中，1支試管放在暗處（或用黑紙包裹），另1支試管放在強(qiáng)光下（太陽光），經(jīng)2—3小時(shí)后，觀察兩支試管中溶液的顏色有何不同？（4）銅在葉綠素分子中的替代作用取上述色素乙醇提取液少許于試管中，1滴1滴地加入鹽酸，直至溶液出現(xiàn)褐綠色，此時(shí)葉綠素分子已遭破壞，形成去鎂葉綠素。然后加醋酸銅晶體1小粒，慢慢地在酒精燈上加熱溶液，使溶液又產(chǎn)生亮綠色，此即表明銅已在葉綠素分子中替代了原來鎂的位置。（5）黃色素和綠色素的分離將葉綠體色素的酒精提取液10毫升倒入分液漏斗中，傾斜漏斗，并沿其壁慢慢加入15毫升汽油（或乙醚），輕輕搖動(dòng)5分鐘，靜置片刻后，溶液即分為兩層，上層為綠色的汽油層，主要含有葉綠素。為使色素分離完全，從分液漏斗放出下層酒精溶液，將之盛于干燥的試管（A）中，再往留在分液漏斗中的汽油層色素溶液加入95%酒精5ml，輕輕搖動(dòng)之，棄去下層黃色溶液，并將上層綠色的葉綠素汽油層提取液放入試管（B）中，用棉花塞住試管口。同樣將試管（A）所盛的黃色酒精溶液倒入分液漏斗中，加入汽油5ml，輕輕搖動(dòng)分液漏斗，將下層黃色溶液放入試管（C）中，塞以棉花。最后用分光鏡觀察綠色溶液和黃色溶液的吸收光譜。（6）黃色和綠色溶液的吸收光譜的觀察用手持分光鏡觀察黃色溶液和綠色溶液的吸收光譜。五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告 1、將紙層析法分離葉綠體色素的實(shí)驗(yàn)結(jié)果貼在實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙上，并給予分析。2、解釋葉綠體色素的光學(xué)性質(zhì)。