侄子,綠原素提取注意事項

【專家解說】：實驗室注意事項 首先就是通風(fēng),有毒氣體和有毒揮發(fā)物要在通風(fēng)櫥下做. 其次,注意不能吸煙,否則易燃易爆物品易引發(fā)危險; 第三,易燃易爆物品通常應(yīng)存放于陰涼避光的專門的物品柜,有機(jī)和無機(jī)試劑分開放,避免污染. 第四,注意水電,還有加熱器的安全性; 第五,操作人員應(yīng)該按規(guī)定穿戴護(hù)具 第六,定期檢查反應(yīng)器,及時排除故障 提取試驗注意事項 一、目的： 1、了解色譜法的原理和應(yīng)用。 2、學(xué)會薄層層析、柱層析操作。 3、懂得偶氮苯的光化異構(gòu)化反應(yīng)原理和產(chǎn)物鑒定。 二、色譜法原理 1、定義：利用混合物通過某一物質(zhì)時，由于這一物質(zhì)對混合物中各組分具有不同的吸 附和溶解性能，或其他親和性能上的差異，從而將各組分分開，而達(dá)到分離 或分析鑒定的目的的操作。 2、分類：按作用原理分：吸附、分配、離子交換、電泳等 按操作方式分：薄層色譜、柱色譜、紙色譜、氣相色譜、液相色譜等 3、應(yīng)用： ① 分離混合物 ② 精制提純化合物 ③ 分析鑒定化合物 ④ 觀察化學(xué)反應(yīng) 三、柱層析 1、吸附劑：常用硅膠、氧化鋁等，顆粒大?。ǔ河?lt;200目），用量（20倍以上）。 2、層析柱：一般柱徑為1~10cm，柱高/柱徑=7.5/1。 3、洗脫劑：選擇合適的溶劑體系（通常用薄層層析進(jìn)行條件摸索）。展開時，溶劑的 極性由小到大（極性吸附劑），或由大到?。ǚ菢O性吸附劑）。 4、裝柱方法：干法和濕法 5、操作：（示范，儀器要干燥） ①裝柱——常用濕法（色譜柱要垂直，把吸附劑用溶劑拌成的湖狀物，一次性均勻加入乘有溶劑且打開活塞滴放著溶劑的層析柱中，使緊密、均勻、無氣泡，溶劑不能流干，裝柱溶劑一般為開始的洗脫溶劑）；吸附劑上常埔一層石英砂。 ② 加樣——可用液體、溶液、固體拌料加入，待柱中溶劑流至剛好泡住吸附劑時， 關(guān)閉活塞，加入樣品，開啟活塞，溶劑流至石英砂層時，關(guān)閉活塞， 然后用少量溶劑洗下粘在柱壁上的樣品（2~3次）。 ③ 洗脫——按要求接收各組分；如不確定，則按等分接收，用薄層層析鑒定后， 再分別合并各組分。 6、實驗內(nèi)容：（二人合作） ① 提取植物色素——用丙酮:石油醚=1:1，10ml，研磨植物樹葉，取綠色有機(jī)層， 此溶液必須當(dāng)次使用，因葉綠素很快分解。 ② 裝柱——用10g硅膠，配丙酮:石油醚=5:95，50ml，按濕法裝柱，不合格重裝。 ③ 加樣——?、俚奶崛∪芤?.5~1ml加入，并用溶劑沖洗柱壁的樣品（2~3次）。 ④ 洗脫——用②配制丙酮:石油醚=5:95，洗脫第一個色帶后，改用丙酮:石油 醚=2 : 8，（50ml） 洗脫，至分成若干色帶即可。 7、結(jié)果描述——畫出不同展開劑展開的實際層析柱圖。 四、薄層層析（示范） 1、制備薄層板——軟板和硬板（加粘合劑）。 ① 薄層材料： 硅膠H、硅膠G、硅膠H254、硅膠G254（注意這是層析硅膠）， 氧化鋁——有堿性、中性、酸性三種 ② 硬板的制法——常用涂布法和浸漬法。 2、浸漬法（快速）制備薄層板的步驟： ① 活化硅膠G——105~110℃，1.5小時； ② 把經(jīng)活化的硅膠G用二氯甲烷在燒杯中調(diào)配成湖狀液（3ml/g）； ③ 把兩塊載波片背合在一起，浸入硅膠G和二氯甲烷的湖狀液中(6cm)，取出涼干， 便制成兩塊薄層板。本實驗用浸漬法。 ④ 示范后，學(xué)生接著制板（每人四塊） 3、點樣： 離底邊0.5~1cm處做記號，用毛細(xì)管吸樣品液點在離邊1cm的記號線上。 A 偶氮苯和光化異構(gòu)化偶氮苯（乙酸乙酯：石油醚=5：95，展開）。 B 乙酰乙酸乙酯、1