簡述氣相色譜法測定六六六和ddt的原理，測定時怎樣除脂肪?為什么?

色譜分離分析方法測定糧食中的六六六、滴滴涕殘留量

 一、氣相色譜分離分析方法

 1、目的：

（1）熟悉糧食樣品中六六六、滴滴涕提取方法 

（2）掌握氣相色譜法測定六六六、滴滴涕的原理和方法

 2、原理：利用電子捕獲檢測器對于負電極強的化合物具有較高的靈敏度這一特點，可分別測出微量的六六六和滴滴涕，也可同時分別測定不同異構體和代謝物。出峰順序為α-666，β-666，γ-666，δ-666，р,р′-DDE，ο,р′DDT，р,р′-DDD，р,р′-DDT。 六六六、滴滴涕及異構體或代謝物含量按下式計算 X=[A1×1000]/[m1(V2／V1)×1000] 

式中 X—樣品中六六六、滴滴涕及其異構體或代謝物的單一含量，㎎/㎏；

 A1—被測定用樣液中六六六或滴滴涕及其異構體或代謝物的單一含量，μg；

V1—樣品凈化液體積，ml；

V2—樣液進樣體積，μL；

m1—樣品質(zhì)量，g。

結果的表述報告取平行測定的算術平均值的兩位有效數(shù)字。

3、儀器及試劑：組織搗碎機、電動振蕩器、旋轉濃縮蒸發(fā)器、吹氮濃縮器、具有電子捕獲檢測器（

ECD）的GC①

丙酮、正己烷、石油醚（沸程30~60℃）、笨、硫酸、無水硫酸鈉、20g/L H2SO4(aq)、六六六、滴滴涕標溶液②，六六六、滴滴涕標準使用液③ 

使用的試劑一般為分析純，有機溶劑需經(jīng)重蒸餾。

4、步驟及記錄

（1）提?。悍Q取約200g具有代表性的樣品（適用于生的計烹調(diào)加工過的蔬菜、水果或谷類、豆類、肉類、蛋類），加適量水于搗碎機搗碎，混勻。稱取勻漿2.00~5.00g于50ml具塞錐形瓶中，加10~15ml丙酮，在振蕩器上振蕩30min，過濾于100ml分液漏斗中，殘渣用丙酮洗滌4次，每次4ml，用少許丙酮洗滌漏斗和濾紙，合并濾液，加入20ml石油醚，搖動數(shù)次，放氣。振蕩1min，然后加入20ml 20g/L NaSO4(aq)，振搖1min靜置分層，棄去下層水溶液。用濾紙擦干分液漏斗頸內(nèi)外的水，然后將石油醚液經(jīng)盛有約10g無水硫酸鈉的漏斗緩緩放出，濾入50ml三角瓶中，再以少量石油醚分三次洗滌原分液漏斗、濾紙和漏斗，洗液并入濾液中，將石油醚濃縮，移入10ml具塞試管中，定容至5.0ml或10.0ml。

（2）、凈化：將5.0ml提取液加0.50ml濃硫酸，蓋上試管塞振搖數(shù)次后，打開塞子放氣，然后振搖30s，于

1600r/min離心15min，上層清液供氣相色譜法分析用。 

（3）、測量：電子捕獲檢測器的線性范圍窄，為了便于定量，選擇樣品進樣量使之適合各組分的線性范圍。據(jù)樣品中六六六、滴滴涕存在形式，相應的繪制各組分的標準曲線，從而計算出樣品中的含量。

5、注意事項

①氣相色譜參考條件：色譜柱為玻璃柱，內(nèi)裝涂以OV-17(15g/L)和QF-1(20g/L)的混合固定液的80~100目硅藻土，NL電子捕獲檢測器   內(nèi)徑3~4mm長1.2~2m 

氣化室溫度 215℃  色譜柱溫度  195℃  檢測器溫度 225℃

載氣N2流速90ml/min   紙速  0.5cm/min 

②六六六、滴滴涕標準溶液的配制：準確稱取α-666、β-666、γ-666、δ-666、р,р′-DDE、ο,р′DDT、р,р′

-DDD、р,р′-DDT各10.0㎎溶于苯，分別移入100ml容量瓶中，加苯至刻度并搖勻，每ml含農(nóng)藥100.0μg，作為儲備溶液存于冰箱中。

③六六六、滴滴涕標準使用液：將上述標準儲備液用己烷稀釋至適宜濃度，一般為0.01μg/ml。

希望對你有一定的幫助。