甲烷氧化菌Methylomonas sp.GYJ3中甲烷單加氧酶基因與16S rRNA序列分析

【摘要】：甲烷氧化細菌中的關鍵酶系甲烷單加氧酶是一個含雙核鐵的多組份氧化酶,常溫、常壓下能夠催化甲烷轉化為甲醇。對甲烷氧化細菌Methylomonas sp.GYJ3中溶解性甲烷單加氧酶基因和16SrDNA進行了測序與分析。利用已知相關基因數據庫信息,設計了PCR引物和測序引物,獲得了滿意的測序結果。全長的溶解性甲烷單加氧酶基因為5690bp,部分16S rDNA的序列長度為1280bp。與已發(fā)表的甲烷氧化細菌中甲烷單加氧酶進行了比較,結果表明MMOX組份中氨基酸序列的同一性為78%到99%,基因序列的同一性為71%到97%,6個組份中orfY片段的同一性相對較低。MMOX氨基酸序列的多序列聯配表明,MMOX序列具有高度保守性,特別是在雙核鐵中心區(qū)域。16S rDNA進化分析顯示Methylomonas sp.GYJ3與γ蛋白細菌是相關聯的,基于MMOX氨基酸序列的進化分析證明,與Methylomonas sp.GYJ3最近似的菌株是Ⅰ型甲烷氧化細菌Methylomonas sp.KSWⅢ。綜合分析表明,菌株GYJ3屬于Ⅰ型甲烷氧化細菌Methylomonas sp.屬。這個結果為Ⅰ型甲烷氧化細菌也能表達溶解性甲烷單加氧酶提供了新的證據。羥基化酶的理論等電點是6.28,理論分子量為248874.41Da。 【作者單位】： 中國科學院蘭州化學物理研究所羰基合成與選擇氧化國家重點實驗室 中國科學院蘭州化學物理研究所羰基合成與選擇氧化國家重點實驗室 中國科學院大連化學物理研究所 中國科學院蘭州化學物理研究所羰基合成與選擇氧化國家重點實驗室
【關鍵詞】： 甲烷單加氧酶 甲烷氧化細菌 序列分析 S rDNA 進化分析
【基金】：國家自然科學基金(20573124) 山東大學微生物技術國家重點實驗室開放課題~~
【分類號】：Q933
【正文快照】： 甲烷是對全球變暖有重要影響的溫室氣體之一,也是重要的自然能源———天然氣的主要成分。常溫、常壓下,甲烷氧化細菌(Methanotrophs)中甲烷單加氧酶(Methanemonooxygenase,簡稱MMO)能夠催化甲烷轉化為甲醇,進一步被細胞內的脫氫酶脫氫氧化生成CO2和H2O。甲烷氧化細菌以甲烷

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