白腐菌產(chǎn)漆酶及其對(duì)印染污水處理的研究

【摘要】：漆酶(E.C.1.10.3.2)是一類含銅的氧化還原酶,利用氧把對(duì)苯二酚(也叫氫醌)氧化后能生成對(duì)苯醌,也常被稱為對(duì)苯二酚的氧化酶。一般存在于真菌和植物中。 因?yàn)榫哂休^高的穩(wěn)定性和較為廣泛的底物專一性,它在有毒物的降解方面、生物傳感器的構(gòu)建、造紙業(yè)等領(lǐng)域具有非常好的應(yīng)用。并且漆酶具有很好的熱穩(wěn)定性,使得漆酶能在各種特殊領(lǐng)域得到重用,例如在功能高分子的合成和污水處理等領(lǐng)域。 本文主要討論如何培養(yǎng)優(yōu)良的白腐菌及其產(chǎn)漆酶的過程。首先從白腐菌菌株的優(yōu)選然后是漆酶的發(fā)酵及其利用,還有用木質(zhì)素沉淀物作為底物對(duì)產(chǎn)漆酶的影響進(jìn)行了研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果,利用白腐菌液體發(fā)酵法產(chǎn)漆酶時(shí),最佳C/N為20,酶活可以達(dá)到4391.91IU/mL。最佳培養(yǎng)溫度為28℃,最佳pH值為4.5。 利用堿性物質(zhì)處理的玉米秸稈中得到的木質(zhì)素沉淀物來產(chǎn)漆酶,發(fā)現(xiàn)產(chǎn)酶效果比沒有木質(zhì)素沉淀物時(shí)的效果要好。搖瓶實(shí)驗(yàn)中,木質(zhì)素沉淀物的濃度為7g/L時(shí),測(cè)得產(chǎn)漆酶的活力為6990.6IU/mL,其他條件不變而不加木質(zhì)素沉淀物時(shí),產(chǎn)漆酶的活力為1400.1IU/mL。此外,添加的一定量的葡萄糖溶液能夠使漆酶的產(chǎn)量提高,數(shù)據(jù)表明,葡萄糖濃度達(dá)10g/L時(shí),產(chǎn)漆酶的活力達(dá)到7303.6IU/mL。跟蹤葡萄糖添加的方式實(shí)驗(yàn)過程發(fā)現(xiàn),如果葡萄糖分批的加入到產(chǎn)酶液中,酶活也能得到明顯提高。 對(duì)漆酶在脫色氧化降解靛藍(lán)和金橙Ⅱ進(jìn)行了研究,從實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)我們得到：漆酶在氧化降解靛藍(lán)時(shí)最適合的pH=4.5,最佳溫度是30℃,用3.9IU/mL的漆酶來進(jìn)行脫色降解反應(yīng)時(shí),420min時(shí)脫色較完全,可以達(dá)90%；而漆酶氧化降解脫色金橙Ⅱ的適合的條件是pH=4.0,30℃,采用濃度為13.5IU/mL的漆酶處理含有金橙Ⅱ的溶液,反應(yīng)達(dá)500min時(shí),脫色較完全,可以達(dá)到90%以上。本文主要研究的是漆酶如何在環(huán)境保護(hù)和印染廢水的處理等的方面發(fā)揮出積極的和重要意義。 【關(guān)鍵詞】：白腐菌 漆酶 液體發(fā)酵 蒽醌 靛藍(lán) 金橙Ⅱ 脫色降解
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：X791
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-9
• 第1章 引言9-19
• 1.1 漆酶的來源10
• 1.2 漆酶的結(jié)構(gòu)10-11
• 1.3 漆酶的催化反應(yīng)機(jī)理11-16
• 1.3.1 漆酶的性質(zhì)11-12
• 1.3.2 漆酶催化反應(yīng)機(jī)理12-13
• 1.3.3 漆酶底物13-15
• 1.3.4 非酶底物15-16
• 1.4 漆酶的主要用途16-19
• 1.4.1 造紙工業(yè)16
• 1.4.2 環(huán)境保護(hù)16-17
• 1.4.3 有機(jī)合成17
• 1.4.4 食品工業(yè)17
• 1.4.5 染料降解17-19
• 第2章 真菌漆酶的微生物生產(chǎn)19-30
• 2.1 培養(yǎng)方式和培養(yǎng)基19-20
• 2.1.1 培養(yǎng)方式19
• 2.1.2 培養(yǎng)條件19-20
• 2.1.3 菌種、試劑與儀器20
• 2.1.4 CPDA培養(yǎng)基20
• 2.2 菌種的篩選20-21
• 2.2.1 產(chǎn)漆酶的初篩21
• 2.2.2 產(chǎn)漆酶菌的復(fù)篩21
• 2.2.3 產(chǎn)漆酶菌株鑒定方法21
• 2.3 酶活測(cè)定方法-----分光光度法21-24
• 2.3.1 主要試劑與儀器22-23
• 2.3.2 測(cè)定漆酶最佳pH值23
• 2.3.3 漆酶的活力的測(cè)定方法23
• 2.3.4 產(chǎn)酶試驗(yàn)23-24
• 2.4 分析方法24-25
• 2.4.1 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線24
• 2.4.2 還原糖的測(cè)定24-25
• 2.4.3 漆酶的活力測(cè)定25
• 2.4.4 木質(zhì)素含量測(cè)定25
• 2.5 培養(yǎng)基的優(yōu)化25-29
• 2.5.1 C/N比對(duì)產(chǎn)漆酶的影響25-26
• 2.5.2 pH值對(duì)產(chǎn)酶的影響26-27
• 2.5.3 培養(yǎng)溫度對(duì)產(chǎn)酶的影響27-28
• 2.5.4 木質(zhì)素沉淀物對(duì)白腐菌產(chǎn)漆酶的影響28-29
• 2.6 小結(jié)29-30
• 第3章 白腐菌粗酶對(duì)染料脫色的研究30-35
• 3.1 材料與方法30-34
• 3.1.1 材料30-32
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)方法32-34
• 3.2 結(jié)論34-35
• 第4章 漆酶降解染料的研究35-41
• 4.1 方法與材料35-36
• 4.1.1 試劑35-36
• 4.2 結(jié)果與討論36-40
• 4.2.1 pH值對(duì)靛藍(lán)脫色的影響36
• 4.2.2 溫度對(duì)漆酶降解靛藍(lán)的影響36-37
• 4.2.3 漆酶對(duì)金橙Ⅱ的脫色降解37-40
• 4.3 小結(jié)40-41
• 第5章 結(jié)論與展望41-43
• 5.1 結(jié)論41-42
• 5.2 建議42-43
• 致謝43-44
• 參考文獻(xiàn)44-46
• 攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果46

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