微生物處理玉米秸稈生產(chǎn)蛋白飼料的研究

【摘要】： 從牛瘤胃中分離高產(chǎn)纖維素酶細(xì)菌，經(jīng)纖維素剛果紅平板初篩、搖瓶培養(yǎng)、固態(tài)發(fā)酵復(fù)篩、得到一株芽孢桿菌X4，該菌不僅可降解纖維素，且自身具固氮能力。最適生長PH為7左右，最適生長溫度為37℃。在發(fā)酵過程中與其他菌株能很好共生。同時從牛瘤胃中分離、篩選得酵母Y2，實(shí)驗(yàn)證明該菌株與其他發(fā)酵菌株具良好配伍性，能利用混菌發(fā)酵產(chǎn)生的還原糖迅速生長，達(dá)到較高的生物量。 利用氨法和白腐真菌L：對玉米秸稈進(jìn)行前期處理，依據(jù)多種微生物共生及代謝的特性，采用多菌種混合共發(fā)酵方式，將康寧木霉和選育出的高活性黑曲霉S",瘤胃細(xì)菌X4，酵母Y：，接種于前處理過的玉米秸稈上共發(fā)酵，利用正交試驗(yàn)，得出：在發(fā)酵溫度30℃，PH5.0發(fā)酵9天后，粗蛋白含量達(dá)24.61％，纖維素降解率為48.37％。 對酵母Y：原生質(zhì)體的制備、再生條件進(jìn)行探索：采用對數(shù)生長前期(約24h)的菌體細(xì)胞，用1.5％蝸牛酶，0.1％p—巰基乙醇，處理60min，原生質(zhì)體形成率可達(dá)95％，用0.6ml／l蔗糖做滲透穩(wěn)定劑，原生質(zhì)體再生效果最佳，再生率為6.32％。 采用He-Ne激光誘變酵母Y：原生質(zhì)體，獲得一株是出發(fā)菌株產(chǎn)生物量1.31倍的酵母Y：。經(jīng)酯酶同工酶譜分析，其酶帶條紋數(shù)，遷移率等均發(fā)生了明顯變化，利用Y：和混菌共發(fā)酵實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，產(chǎn)物中粗蛋白可提高到28.10％，此時纖維素降解率為51.12％。 【關(guān)鍵詞】：篩選 多菌種共發(fā)酵 玉米秸稈 蛋白飼料 原生質(zhì)體 He-Ne激光 誘變
【學(xué)位授予單位】：西北大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2002
【分類號】：S816.5
【目錄】：

• 第一部 前言10-23
• 1 秸稈的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)10-11
• 1．1 秸稈的結(jié)構(gòu)及碳水化合物的構(gòu)成10
• 1．2 纖維素10
• 1．3 半纖維素10-11
• 1．4 木質(zhì)素11
• 2 秸稈類飼料開發(fā)利用的限制因素11-12
• 2．1 粗纖維含量11
• 2．2 粗蛋白含量11-12
• 2．3 木質(zhì)素含量12
• 2．4 維生素的含量12
• 3 秸稈的加工處理方法及其效果12-14
• 3．1 物理法12
• 3．2 化學(xué)法12-14
• 3．2．1 酸堿處理法12
• 3．2．2 氧化法12-13
• 3．2．3 氧化劑處理13-14
• 4 生物處理法14-19
• 4．1 生物處理應(yīng)用的主要微生物14-15
• 4．1．1 降解木質(zhì)素的主要微生物14
• 4．1．2 降解纖維素的主要微生物14-15
• 4．2 微生物處理農(nóng)作物秸稈存在問題15-16
• 4．3 自然發(fā)酵法處理玉米秸稈16
• 4．3．1 抑制不良發(fā)酵的添加劑16
• 4．3．2 營養(yǎng)添加劑16
• 4．3．3 酶制劑16
• 4．3．4 微生物制劑16
• 4．4 加曲（混菌）發(fā)酵玉米秸稈16-18
• 4．4．1 混合菌發(fā)酵木質(zhì)纖維素16-17
• 4．4．2 混合菌發(fā)酵優(yōu)勢17
• 4．4．3 混合菌發(fā)酵法的三種體系17-18
• 4．5 其他秸稈生物處理法18
• 4．6 微生物處理農(nóng)作物秸稈生成蛋白飼料應(yīng)用前景及發(fā)展趨勢18-19
• 4．6．1 微生物發(fā)酵農(nóng)作物秸稈生產(chǎn)蛋白飼料的優(yōu)點(diǎn)18
• 4．6．2 農(nóng)作物秸稈開發(fā)利用工作重點(diǎn)及發(fā)展前景18-19
• 5 誘變育種19-21
• 5．1 激光誘變育種19-20
• 5．2 原生質(zhì)體誘變育種20-21
• 6 同工酶技術(shù)21-23
• 6．1 同工酶的生物學(xué)意義21
• 6．2 同工酶電泳用于真菌（酵母）分類及鑒定21
• 6．3 同工酶技術(shù)簡介21-23
• 第二部分 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容23-35
• 1 實(shí)驗(yàn)材料23-25
• 1．1 菌種來源23
• 1．2 試劑和主要原料23-24
• 1．3 主要培養(yǎng)基24-25
• 1．3．1 斜面培養(yǎng)基24
• 1．3．2 平皿分離培養(yǎng)基24
• 1．3．3 加富培養(yǎng)基24
• 1．3．4 細(xì)菌篩選和鑒定培養(yǎng)基24-25
• 1．3．5 酵母鑒定培養(yǎng)基25
• 1．3．6 制備酵母原生質(zhì)體所用培養(yǎng)基25
• 1．3．7 混菌固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基25
• 2 實(shí)驗(yàn)方法25-35
• 2．1 菌種的分離篩選25-27
• 2．1．1 可降解纖維素細(xì)菌的分離25
• 2．1．2 可降解纖維素細(xì)菌的篩選25-26
• 2．1．3 菌株形態(tài)及生理生化特性26
• 2．1．4 酵母菌的分離26
• 2．1．5 酵母菌的篩選26-27
• 2．1．6 酵母菌的初步鑒定27
• 2．2 混菌發(fā)酵玉米秸稈生產(chǎn)蛋白飼料的研究27-28
• 2．2．1 不同化學(xué)預(yù)處理方法對秸稈的影響27
• 2．2．2 不同濃度氨水處理對秸稈的影響27
• 2．2．3 白腐真菌Lx在氨化后秸稈上生長情況27
• 2．2．4 固態(tài)發(fā)酵流程接種時間27-28
• 2．2．5 多菌種共發(fā)酵正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)確定最佳發(fā)酵條件28
• 2．2．6 固態(tài)發(fā)酵流程28
• 2．2．7 混菌發(fā)酵完畢后曲料特征28
• 2．3 酵母Y_2原生質(zhì)體的制備和再生28-29
• 2．3．1 酵母Y_2原生質(zhì)制備和再生方法28-29
• 2．3．2 細(xì)胞菌齡對原生質(zhì)體形成率和再生率的影響29
• 2．3．3 β-硫基乙醇濃度對原生質(zhì)體形成率和再生率的影響29
• 2．3．4 酶濃度對原生質(zhì)體形成率和再生率的影響29
• 2．3．5 酶解時間對原生質(zhì)體形成率和再生率的影響29
• 2．3．6 酶溶液PH值對原生質(zhì)體形成率和再生率的影響29
• 2．3．7 酶解溫度對原生質(zhì)體形成率和再生率的影響29
• 2．3．8 滲穩(wěn)劑對原生質(zhì)體再生率影響29
• 2．3．9 最佳滲透壓穩(wěn)定劑濃度的確定29
• 2．3．10 酵母Y_(2)原生質(zhì)體制備最佳條件29
• 2．4 激光誘變29-31
• 2．4．1 He-Ne激光誘變原生質(zhì)體29-30
• 2．4．2 誘變時間對原生質(zhì)體再生率的影響30
• 2．4．3 激光對原生質(zhì)體的誘變效果30-31
• 2．5 纖維素酶活的測定31-32
• 2．6 還原糖的測定32-33
• 2．6．1 分析原理32
• 2．6．2 分析試劑32
• 2．6．3 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制定32-33
• 2．7 粗纖維的測定33
• 2．8 粗蛋白的測定33-34
• 2．9 酵母菌株生物量測定34
• 2．10 主要儀器34-35
• 第三部分 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論35-48
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果35-48
• 3．1 菌種的分離篩選35-38
• 3．1．1 可降解纖維素細(xì)菌的分離35
• 3．1．2 可降解纖維素細(xì)菌的篩選35-36
• 3．1．3 X_4菌株形態(tài)和生理生化特征36-37
• 3．1．4 酵母菌的分離37
• 3．1．5 酵母菌的篩選37-38
• 3．2 混菌發(fā)酵玉米秸稈生產(chǎn)蛋白飼料的研究38-43
• 3．2．1 在固態(tài)秸稈培養(yǎng)基上用不同化學(xué)預(yù)處理方法對秸稈的影響38
• 3．2．2 不同濃度氨水處理玉米秸稈粉，粗纖維粗蛋白含量變化38-39
• 3．2．3 白腐真菌L_x在氨化后秸稈上生長情況39
• 3．2．4 固態(tài)發(fā)酵流程接種時間39-40
• 3．2．5 多菌種共發(fā)酵正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)確定最佳發(fā)酵條件40-43
• 3．2．6 固態(tài)發(fā)酵流程43
• 3．2．7 混菌發(fā)酵結(jié)束后曲料特征43
• 3．3 酵母Y_2原生質(zhì)體的制備和再生43-47
• 3．3．1 酵母Y_2原生質(zhì)體的制備和再生方法43
• 3．3．2 細(xì)胞菌齡對原生質(zhì)體形成率和再生率的影響43-44
• 3．3．3 β-巰基乙醇對原生質(zhì)體形成率和再生率的影響44
• 3．3．4 酶濃度對原生質(zhì)體形成率和再生率的影響44
• 3．3．5 酶解時間對原生質(zhì)體形成率和再生率的影響44-45
• 3．3．6 酶溶液PH值對原生質(zhì)體形成率和再生率的影響45
• 3．3．7 酶解溫度對原生質(zhì)體形成率和再生率的影響45-46
• 3．3．8 滲穩(wěn)劑對原生質(zhì)體再生率影響46
• 3．3．9 最佳滲透壓穩(wěn)定劑濃度的確定46-47
• 3．4 激光誘變47-48
• 3．4．1 He-He激光誘變原生質(zhì)體47
• 3．4．2 誘變時間對原生質(zhì)體再生率的影響47
• 3．4．3 激光對原生質(zhì)體的誘變效果47-48
• 小結(jié)48-49
• 參考文獻(xiàn)49-53
• 致謝53-54
• 圖版54-55

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野生平菇    單洪濤

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傳統(tǒng)醬種曲中霉菌的分離鑒定及培養(yǎng)條件的優(yōu)化    劉彩香

細(xì)菌對秸稈營養(yǎng)轉(zhuǎn)化的影響    吉增福,周緯武,景耀光,謝寶昌,趙宏坤,劉洋,方武,吉新衛(wèi),尉美林

生物技術(shù)在食品業(yè)的應(yīng)用    李云龍，鄭秋鹛，李景鵬，程濤，薛飛

單細(xì)胞蛋白飼料的生產(chǎn)與應(yīng)用    趙守賢;

以食品工業(yè)廢糟渣為載體培養(yǎng)濃縮活性飼料酵母的研究及飼喂試驗(yàn)    姜新生

關(guān)于微生物處理秸稈的幾個概念    王加啟

幾種植物原生質(zhì)體的掃描電鏡觀察    何若天,吳丹紅,李景植

原生質(zhì)體掃描電鏡觀察研究方法的改進(jìn)及其效果初報(bào)    鐘榮亮

疫毒蛋白質(zhì)的聚丙烯酰胺凝膠盤狀電泳    徐大雅;黃河;王春平;

畢氏酵母營養(yǎng)缺陷株P(guān)315株原生質(zhì)體形成和再生的研究    譚蓓英;王花;孫玉琴;

青霉的纖維素酶抗降解物阻遏突變株的選育    曲音波;高培基;王祖農(nóng);

多菌種混合發(fā)酵玉米秸稈生產(chǎn)含酶蛋白飼料的研究    王慧杰;李自剛;辛婷;李欣;

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微生物處理玉米秸稈對羔羊舍飼育肥效果的影響    胡鵬飛;吳增華;孫陶;于國慶;

發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料中培養(yǎng)基原料配比的實(shí)驗(yàn)研究    高大威,李 瑛

混合菌發(fā)酵玉米秸稈生產(chǎn)菌體蛋白飼料的研究    張偉心,馬艷玲,霍玉鵬

利用作物秸稈生產(chǎn)微生物飼料的研究綜述    張秀云;

熱噴技術(shù)處理玉米秸稈試驗(yàn)    畢東輝;

玉米秸稈直接還田與堆漚還田的效果比較    王英;

玉米秸稈飼喂反芻家畜配套新技術(shù)    

粉狀玉米秸稈微生物飼料喂肉鴨試驗(yàn)    彭華,安只紅

淺談北方地區(qū)秸稈利用技術(shù)    李淑艷;張海;趙志強(qiáng);

~(13)C標(biāo)記玉米秸稈分解過程中有機(jī)碳變化規(guī)律研究    暴春平;郭巖彬;楊景娜;吳文良;孟凡喬;

干玉米秸混菌兩次發(fā)酵方法研究    李景云;馬彥昆;蘇江順;張維琴;許翠華;趙立群;

不同加水量對玉米秸稈發(fā)酵酒精的影響    董惠鈞;李華;賈士儒;

玉米秸稈的飼料加工利用技術(shù)探析    侯方安;康云友;

玉米秸稈雙孢蘑菇冬種技術(shù)的研究與推廣    孟麗;許桂芳;

利用玉米秸稈制備定向刨花板的研究    楊蕊;

長期施用玉米秸桿對黑土團(tuán)聚體中腐殖質(zhì)組成和性質(zhì)的影響    陳輝;竇森;

玉米秸稈顆粒燃料致密成型電耗測試    李在峰;雷廷宙;何曉峰;楊樹華;

玉米秸稈微貯喂牛效果好    辛志;白春會;丁玉臣;曹桂霞;

玉米秸稈做溫室：省錢效益高    樂亭縣樂亭鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)辦 李世珍

廣平4.5萬畝秸稈變成飼料“罐頭”    馬永存、寧學(xué)玲、姜艷

廣平秸稈飼料“遠(yuǎn)嫁”韓國    記者 鄭惠華通訊員 馬永存 郝愛良

玉米秸稈變成金    張相 羅立源 記者　付強(qiáng)

玉米秸稈飼料加工十大技術(shù)    

13萬畝玉米秸稈何時生金    本報(bào)記者 楊濤軍

冬季如何堆制玉米秸稈肥    吳凡

開魯縣為玉米秸稈管理“立法”    楊衛(wèi)東

玉米秸稈栽培食用菌要點(diǎn)    沈瑞

山東張店：玉米秸稈變成寶貴資源    本報(bào)記者 單保江通訊員 張秀貴

微波輔助下木質(zhì)纖維素降解與溶解過程的研究    牟莉

玉米秸稈保質(zhì)貯存及水熱反應(yīng)處理提高可生化性方法的研究    孫優(yōu)善

蛋白飼料在雞胃腸道中的肽類釋放規(guī)律及其吸收特點(diǎn)研究    王麗娟

砂姜黑土區(qū)小麥玉米一年兩熟秸稈全量還田對夏玉米生育及產(chǎn)量影響研究    沈?qū)W善

秸稈培肥土壤對大孔隙流中養(yǎng)分淋失的影響    耿玉輝

燃料乙醇固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)工藝的研究    王瑞明

玉米秸稈發(fā)酵生產(chǎn)酒精的研究    張強(qiáng)

在高植物蛋白飼料中添加膽固醇、?；撬岷痛蠖乖磉皩Υ罅怫疑L性能和膽固醇代謝的影響    贠彪

生物質(zhì)白腐菌改性與抗性變化的關(guān)系研究    徐春燕

玉米秸稈為原料燃料乙醇制備的關(guān)鍵問題研究    李冬梅

微生物處理玉米秸稈生產(chǎn)蛋白飼料的研究    張紅蓮

纖維素酶高產(chǎn)菌株選育與玉米秸稈生產(chǎn)酒精工藝研究    王倩

甜椒有機(jī)栽培基質(zhì)的研究    邊鳴鏑

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松嫩草原重度鹽堿化草地玉米秸稈改良研究    吳泠

添加劑對玉米秸稈青貯飼料質(zhì)量影響的試驗(yàn)研究    席興軍

利用體外產(chǎn)氣法研究玉米秸稈瘤胃發(fā)酵的影響因素    許琴

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玉米秸稈莖葉分離機(jī)理試驗(yàn)研究    高夢祥

奶牛常用飼草瘤胃降解規(guī)律的研究    賈海軍