煙草秸稈生物有機(jī)肥攜帶病毒的血清學(xué)檢測

【摘要】：煙草秸稈是一種營養(yǎng)豐富的有機(jī)肥資源,在農(nóng)田的土壤改良、增產(chǎn)增收等方面都有較好利用效果。在煙草種植業(yè),煙葉收獲后,其秸稈通常遺棄田間或燒毀,這種傳統(tǒng)的處理方式,一是造成有效資源浪費(fèi)；二是導(dǎo)致環(huán)境污染。為此,湖北省煙草公司為合理利用我省煙草秸稈資源,在恩施州建立了煙草秸稈生物有機(jī)肥生產(chǎn)廠,從而進(jìn)一步提高了煙草生產(chǎn)的附加值。由于煙草秸稈自然條件下殘存有病原物,且具有潛在致病性。在有機(jī)肥生產(chǎn)過程中,秸稈的病原物是否致死,直接關(guān)系到成品肥應(yīng)用的安全性。 本文對煙草秸稈生物有機(jī)肥生產(chǎn)的不同發(fā)酵工序、不同發(fā)酵時(shí)間等成品肥,進(jìn)行病毒檢測和盆栽傳毒試驗(yàn),旨在為煙草秸稈生物有機(jī)肥生產(chǎn)應(yīng)用的安全性提供依據(jù)。主要研究如下： 1、煙草秸稈原材料病毒檢測：通過對不同批次的煙草秸稈系材料進(jìn)行病毒檢測,結(jié)果表明原材料中存在TMV、CMV、PVX、PVY4種病毒。 2、不同消毒方式病毒檢測：利用4種病毒抗血清對不同消毒方式的煙草秸稈有機(jī)肥產(chǎn)品進(jìn)行檢測,結(jié)果表明烤房消毒的產(chǎn)品對4種病毒抗血清呈陰性反應(yīng),滾筒消毒的產(chǎn)品對4種病毒抗血清呈陽性反應(yīng),經(jīng)過紫外消毒的產(chǎn)品對4種病毒抗血清呈陽性反應(yīng)。 3、不同消毒時(shí)間病毒檢測：經(jīng)過紫外消毒不同時(shí)間的產(chǎn)品仍然都對4種病毒抗血清呈現(xiàn)陽性反應(yīng),經(jīng)過100℃以下的不同溫度不同時(shí)間消毒的產(chǎn)品對4種病毒抗血清呈現(xiàn)陽性反應(yīng),經(jīng)過100℃以上的高溫消毒一定時(shí)間的產(chǎn)品對4種病毒抗血清呈現(xiàn)陰性反應(yīng)。表明采用100℃以上的高溫消毒方式可殺滅病毒或抑制病毒活性。 4、成品肥盆栽傳毒試驗(yàn)：有機(jī)肥與復(fù)合肥盆栽煙草生長正常,外觀無典型病毒病癥狀表現(xiàn),未檢測出煙草花葉病毒；其他盆栽處理表現(xiàn)出煙草花葉病毒表現(xiàn)出花葉、明脈等癥狀,可檢測出TMV和CMV病毒。 根據(jù)對煙草秸稈生物有機(jī)肥原料、不同消毒方式和時(shí)間的中間產(chǎn)品、成品肥病毒檢測及盆栽傳病試驗(yàn)結(jié)果,研究認(rèn)為,恩施州煙草公司生產(chǎn)的煙草秸稈生物有機(jī)肥在生產(chǎn)上應(yīng)用是安全的。 【關(guān)鍵詞】：煙草秸稈 生物有機(jī)肥 煙草病毒 酶聯(lián)免疫檢測 盆栽試驗(yàn)
【學(xué)位授予單位】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：S141
【目錄】：

• 目錄4-6
• 摘要6-7
• ABSTRACT7-9
• 1. 文獻(xiàn)綜述9-16
• 1.1 我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)面臨的肥效問題9
• 1.2 煙草秸稈生物有機(jī)肥應(yīng)用現(xiàn)狀9-10
• 1.3 煙草病毒病的發(fā)生與危害10-11
• 1.4 煙草秸稈有機(jī)肥生產(chǎn)11-12
• 1.5 煙草病毒病的檢測方法12-15
• 1.5.1 指示植物法13
• 1.5.2 血清學(xué)檢測13-14
• 1.5.3 電子顯微技術(shù)14-15
• 1.5.4 分子生物學(xué)檢測15
• 1.6 研究目的和意義15-16
• 2. 材料與方法16-22
• 2.1 材料16-19
• 2.1.1 煙草秸稈原材料及生物有機(jī)肥樣品16
• 2.1.2 煙草秸稈原料和成品肥紫外線及高溫消毒16-18
• 2.1.3 酶聯(lián)免疫檢測材料18
• 2.1.3.1 抗血清18
• 2.1.3.2 緩沖液18
• 2.1.4 煙草盆栽試驗(yàn)材料18-19
• 2.1.4.1 供試煙草秸稈有機(jī)肥材料18-19
• 2.1.4.2 供試煙草品種19
• 2.2 方法19-22
• 2.2.1 煙草秸稈生物有機(jī)肥攜帶病毒檢測方法19-20
• 2.2.1.1 病毒檢測樣品制備19
• 2.2.1.2 間接酶聯(lián)免疫檢測法(ID-ELISA)19-20
• 2.2.1.3 雙抗體夾心免疫檢測法(DAS-ELISA)20
• 2.2.2 煙草秸稈生物有機(jī)肥盆栽傳毒試驗(yàn)20-22
• 2.2.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)20-21
• 2.2.2.2 盆栽試驗(yàn)方法21
• 2.2.2.3 不同處理盆栽煙草發(fā)病植株酶聯(lián)免疫病毒檢測21-22
• 3. 結(jié)果分析22-28
• 3.1 煙草秸稈生物有機(jī)肥攜帶病毒檢測結(jié)果22-25
• 3.1.1 煙草秸稈生物有機(jī)肥中間階段產(chǎn)品檢測結(jié)果22-23
• 3.1.2 煙草秸稈原料和成品肥不同消毒方式病毒檢測結(jié)果23-25
• 3.2 盆栽煙草傳毒試驗(yàn)結(jié)果25-28
• 3.2.1 盆栽煙草植株發(fā)病情況25-27
• 3.2.2 盆栽煙草酶聯(lián)免疫檢測結(jié)果27-28
• 4. 小結(jié)與討論28-30
• 4.1 煙草秸稈有機(jī)肥攜帶病毒檢測分析28-29
• 4.2 盆栽煙草傳毒試驗(yàn)分析29-30
• 參考文獻(xiàn)30-38
• 致謝38

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皖北煙區(qū)煙草病毒病發(fā)生的主要原因分析    雷艷麗,高正良,周本國,吳廷全

煙草馬鈴薯Y病毒研究進(jìn)展    寧金花;周偉;黃松青;李余糧;

黑龍江省煙草病毒病發(fā)生流行特征分析    張俊華,張明厚

植物病毒的電鏡診斷    洪健,陳集雙,周雪平,李德葆

黃瓜花葉病毒亞組研究進(jìn)展    徐平東,謝聯(lián)輝

應(yīng)用改進(jìn)的DAS-ELISA法快速檢測馬鈴薯病毒    宋吉軒;范士杰;董穎蘋;顏謙;張敏;張德宇;

RT-PCR快速檢測3種煙草病毒技術(shù)    谷瑞華;王進(jìn)忠;文思遠(yuǎn);王升啟;張愛環(huán);魏艷敏;

湖南省煙草病毒種類的初步鑒定    蕭啟明,劉學(xué)端,黃聲儀,吳力游

煙草病毒病的發(fā)生與防治研究進(jìn)展    馬國勝,何博如

煙草花葉病毒株系研究進(jìn)展    雷彩燕;王振躍;張振臣;

煙草病毒的檢測和防治新技術(shù)研究    朱常香

煙草蝕紋病毒CP、HC-Pro基因克隆及與甘蔗花葉病毒之間交互保護(hù)作用的研究    王秀敏

云南煙草病毒檢測及防治研究    劉勇

油菜病毒株系鑒定和抗病相關(guān)基因研究及轉(zhuǎn)基因飄逸評價(jià)    蔡麗

石河子地區(qū)加工番茄病毒種類的ELISA檢測及分子鑒定    許文博

陜西省煙草病毒病毒源的鑒定及種群區(qū)系的分布    王秀敏

河南省煙草馬鈴薯Y病毒體外特性及血清學(xué)檢測技術(shù)的研究    秦艷紅

植物病毒侵染寄主的分子細(xì)胞學(xué)研究    王衛(wèi)兵

貴州3種馬鈴薯病毒的DAS-ELISA檢測及分子鑒定    鄭世玲

湖南省煙草病毒病的檢測及防治研究    張洪波

山東省玉米病毒病病原研究初報(bào)    尚佑芬,王升吉,趙玖華,路興波,孫紅煒,楊崇良

黃瓜花葉病毒山東分離物外殼蛋白基因的克隆及序列分析    崔連民,張福進(jìn),朱常香,劉學(xué)春

防治煙草根黑腐病的藥劑篩選    趙永強(qiáng);張薇;張廣民;

番茄黃化曲葉病的發(fā)生危害、病原檢測及防治措施    趙玖華;尚佑芬;王升吉;李燕霞;郭和平;

防治煙草青枯病的藥劑篩選    賈春燕;鄭洪波;張茹萍;賈玉;鄭翠梅;張廣民;陳秀齋;溫亮;

山東省主產(chǎn)煙區(qū)煙草炭疽病菌的鑒定與分子檢測    賈玉;鄭翠梅;張廣民;陳秀亭;溫亮;田福海;楊永花;

農(nóng)寶中藥植物營養(yǎng)膠在烤煙生產(chǎn)上的應(yīng)用效果    王喜功;朱奎;王錫金;劉宏;劉春菊;高玉平;禚照卿;

我國煙草病毒病的發(fā)生現(xiàn)狀及防治進(jìn)展    雷艷麗

煙草病毒病藥劑防治試驗(yàn)研究    田立保,楊清林,梁志勇,崔志軍,孟凡武,趙偉玲

侵染西瓜的西瓜花葉病毒生物學(xué)鑒定    伍萬榮,王杰,張大偉,范衛(wèi)紅,盧申

煙草病毒病及毒源植物種類研究分析    夏先全;蔣文平;劉茜茜;

植煙土壤營養(yǎng)對煙草病毒病發(fā)生影響的研究    李忠環(huán);陳靜;徐云;高福宏;彭云;陶瓊;李向東;楊韶松;鞠福清;施曉群;

馬鈴薯Y病毒屬病毒的蚜傳機(jī)制研究進(jìn)展    洪楓;劉映紅;

胺鮮酯對煙草花葉病的控制作用及農(nóng)藝性狀的影響    劉森;丁偉;程小龍;徐小洪;謝華東;王占偉;王紹吉;

重慶武隆地區(qū)煙草花葉病病原種類鑒定及煙草TuMV流行分析    李夏蓮;劉映紅;洪楓;

不同栽培措施對煙草花葉病及烤煙產(chǎn)量和質(zhì)量的影響    尹湧華;劉映紅;

煙草青枯病發(fā)生與檢測技術(shù)研究進(jìn)展    吳金鐘;黃俊麗;蔣同生;王榮忠;

重慶煙草馬鈴薯Y病毒病的發(fā)生與綜合防治措施    李華;楊再艷;劉懷;劉映紅;徐毅丹;

中國番茄主要病害抗病育種研究進(jìn)展    李景富;張賀;許向陽;

水仙黃條病毒的RT-PCR高效檢測    劉博;明軍;羅鳳霞;劉春;張永春;袁素霞;王曉武;

煙草脈帶花葉病毒、蕪菁花葉病毒和馬鈴薯Y病毒的遺傳結(jié)構(gòu)分析    張成玲

重要植物疫害的檢測鑒定及分子系統(tǒng)學(xué)研究    廖芳

辣椒疫霉（Phytophthora capsici）誘導(dǎo)壞死蛋白基因克隆及功能研究    馮寶珍

煙草內(nèi)生細(xì)菌Itb57生物學(xué)性狀及其對黑脛病的控制研究    馬冠華

套種大蒜對煙田生物群落的影響    賴榮泉

文蛤“菊花瘟”在江蘇地區(qū)的流行病學(xué)、病理學(xué)以及病原學(xué)研究    萬夕和

我國大豆花葉病毒的株系分化、P3基因序列特征以及大豆對強(qiáng)毒株系抗病基因的標(biāo)記定位    楊清華

紅大煙葉化學(xué)成分與感官評吸質(zhì)量特征及相互關(guān)系研究    張錦韜

翻譯與非翻譯馬鈴薯Y病毒外殼蛋白基因介導(dǎo)的抗病性比較    郭興啟

煙草花葉病毒弱毒疫苗的研制及其分子生物學(xué)    邵碧英

番茄抗青枯病自交系選育及其雜交配組試驗(yàn)    魏仕偉

滬杭地區(qū)番茄上黃瓜花葉病毒基因多態(tài)性的研究    王曉明

幾種植物病毒侵染寄主的組織病理學(xué)和診斷研究    鄭瑛

具有防治大白菜軟腐病功能的生物有機(jī)肥的研制    李娟

百合雙價(jià)抗病毒載體的構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化的研究    白建芳

dsRNA介導(dǎo)的煙草抗黃瓜花葉病毒（CMV）和馬鈴薯Y病毒（PVY）研究    宋培培

滇西北大花紅景天化學(xué)成分及抗TMV活性研究    王云美

浙江香料煙葉品質(zhì)形成規(guī)律及其主要栽培調(diào)控技術(shù)研究    高東海

攀枝花煙草病毒病綜合防治技術(shù)探索與研究    馮長春

烏魯木齊地區(qū)馬鈴薯病毒和類病毒的分子鑒定及檢測技術(shù)研究    董代幸

山東省大豆花葉病毒株系鑒定    羅瑞梧;楊崇良;尚佑芬;趙玖華;李長松;

脫毒馬鈴薯Y病毒再侵染及運(yùn)轉(zhuǎn)規(guī)律研究    王培倫,馬偉青,楊元軍,張衛(wèi)華,黃傳紅,孫慧生

黃瓜花葉病毒山東分離物外殼蛋白基因的克隆及序列分析    崔連民,張福進(jìn),朱常香,劉學(xué)春

國內(nèi)外植物病毒研究發(fā)展概況    尚佑芬

我國煙草病毒病的發(fā)生現(xiàn)狀及防治進(jìn)展    雷艷麗

安徽省煙草脈斑病(PVY)的發(fā)生趨勢及防治措施    周本國,高正良,劉小平

侵染西瓜的黃瓜花葉病毒的生物學(xué)鑒定    張大偉,范衛(wèi)紅,張超,王杰

湖北主產(chǎn)煙區(qū)烤煙化學(xué)成分的變異分析    何結(jié)望;王欣;占金林;閆鐵軍;黎妍妍;許自成;

3.95%病毒必克可濕性粉劑防治煙草花葉病毒病試驗(yàn)    趙同貴;盧玉文;鄧偉;莫熙禮;

幾種防治煙草病毒病生物制劑的研究進(jìn)展    徐宸;陳德鑫;

平行檢測六種植物病毒和類病毒的基因芯片技術(shù)    朱聰;郭江峰;丁先鋒;陳集雙;杜志游;

煙草種質(zhì)資源抗煙草黃瓜花葉病毒病鑒定研究    王鳳龍;時(shí)焦;錢玉梅;王勁波;史萬華;韓曉東;

馬鈴薯Y病毒衣殼蛋白基因片段長度和結(jié)構(gòu)對RNA介導(dǎo)抗病性的影響    朱俊華

幾種植物病原原核生物實(shí)時(shí)熒光PCR檢測方法的研究    廖曉蘭

轉(zhuǎn)移相關(guān)基因CD44和胃癌關(guān)系的研究    王道榮

小麥黃色花葉病毒RNA1的自然變異分析    楊軍

人酸性成纖維細(xì)胞生長因子在大腸桿菌和酵母中的表達(dá)、純化及其特性分析    余瑛

重組人源抗HBsAg單鏈抗體在大腸桿菌和巴氏畢赤酵母中的表達(dá)、純化與性質(zhì)鑒定    熊盛

馬鈴薯Y病毒山東分離物株系鑒定及其外殼蛋白基因的克隆    王秀芳

番茄環(huán)斑病毒及轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的分子檢測技術(shù)研究    趙文軍

mae和misgurin兩種基因表達(dá)載體的構(gòu)建及其在畢赤酵母中的表達(dá)    龔杰萬

重組人巨細(xì)胞病毒（HCMV）嵌合肽的構(gòu)建及其在畢赤酵母中的表達(dá)    鄭育聲

A型肉毒毒素Hc段基因在大腸桿菌及畢赤酵母中的表達(dá)    于宗振

區(qū)別偽狂犬病病毒株和疫苗株的熒光實(shí)時(shí)定量PCR方法的建立    李璟

淀粉液化芽孢桿菌中性植酸酶基因在大腸桿菌和畢赤酵母中的高效表達(dá)    陳艷

豬瘟病毒主要抗原蛋白在畢赤酵母和大腸桿菌中的表達(dá)    尹雙輝

馬鈴薯病毒與類病毒檢測芯片的制備及應(yīng)用    谷宇

轉(zhuǎn)基因抗草甘膦大豆參比分子的構(gòu)建    董流昕

腐植酸在紅中生物有機(jī)肥作用機(jī)理的探討    萬良新

生物有機(jī)肥在果樹上的應(yīng)用效果研究    楊卓亞,陳清火,徐榮文

生物有機(jī)肥對水稻產(chǎn)量的影響    魏日鳳,劉偉

地恩地的“龍之夢”    毛松 ,張洪海

新型肥料——微生物肥料講座(五)    張巨源;

生物有機(jī)肥對調(diào)虧灌溉下冬小麥苗期生長的影響    孔慶波,聶俊華,張青

生物有機(jī)肥不同用量與方法對西瓜產(chǎn)量和品質(zhì)的影響    段大海;孫頂國;張培蘋;

一種生物有機(jī)肥及其生產(chǎn)工藝    

腐殖酸在紅中生物有機(jī)肥作用機(jī)理的探討    萬良新

長效生物有機(jī)肥——新興肥料    商萬友;

“遼果”生物有機(jī)肥在果樹上的應(yīng)用效果研究    高樹青;王寶申;陳寶江;王炳華;劉秀春;高艷敏;

生物有機(jī)肥的開發(fā)和應(yīng)用    和琳;何鋒;何策熙;肖文琳;

生物有機(jī)肥在桑樹上試驗(yàn)效果    吳心強(qiáng);周健;蔡武寧;

生物有機(jī)肥對提高番茄產(chǎn)量和品質(zhì)的機(jī)理初探    李夢梅;唐小付;黃文浩;

腐植酸生物有機(jī)肥是發(fā)展低碳農(nóng)業(yè)的必然選擇    于廣武;張賀;李曉冰;

生物有機(jī)肥肥效機(jī)理及對作物產(chǎn)量、品質(zhì)的影響    路鈺;于福成;于明;程波;

生物有機(jī)肥對香蕉幼苗生長及根系活力的影響    匡石滋;田世堯;李春雨;劉傳和;凡超;劉巖;

氨基酸生物有機(jī)肥在梨樹上的應(yīng)用效果研究    高曉燕;代明亮;李松濤;李天忠;

“和旺”生物有機(jī)肥真誠為“三農(nóng)”服務(wù)    

財(cái)政部 國家稅務(wù)總局關(guān)于有機(jī)肥產(chǎn)品免征增值稅的通知(摘要)    

成都最大生物有機(jī)肥廠邛崍動工    姚凱峰　本報(bào)記者 洪繼東

木薯酒精廢渣可做生物有機(jī)肥    丁品

科學(xué)施肥給農(nóng)民朋友帶來實(shí)惠    

生物有機(jī)肥規(guī)模生產(chǎn)新工藝問世    魏雙林

生產(chǎn)綠色食品 使用生物有機(jī)肥    本報(bào)記者 師曉京

20家有機(jī)肥企業(yè)萎縮了一半    記者　 金鵬

肥一方水土 富萬家百姓    童長水

青龍建成我市首個(gè)生物有機(jī)肥生產(chǎn)基地    賈鳳超 高智虹

肥地增產(chǎn)富了農(nóng)家壯大了自家    

兵團(tuán)生物有機(jī)肥統(tǒng)一冠名    實(shí)習(xí)記者 鄭婭莉 熱依汗古麗

啤酒糟型生物有機(jī)肥堆制條件及其應(yīng)用效果研究    喻夜蘭

菌根真菌和生物有機(jī)肥結(jié)合對棉花土傳黃萎病防控作用及其機(jī)制    張國漪

生物有機(jī)肥防控黃瓜土傳立枯病效果及防控機(jī)理    黃新琦

土傳煙草青枯病的生物防控及其機(jī)理研究    劉艷霞

麥草與雞糞好氧堆肥中優(yōu)勢真菌的分離、鑒定及其作用研究    李鳴雷

Bacillus cereus X5的殺線活性及其生物有機(jī)肥對南方根結(jié)線蟲的防治作用研究    肖同建

生物有機(jī)肥對土傳馬鈴薯青枯病的防控技術(shù)及機(jī)理研究    丁傳雨

多粘類芽孢桿菌SQR-21芽孢形成、萌發(fā)特征研究    霍振華

抗甜瓜枯萎病生防菌及其生物有機(jī)肥的生防機(jī)理研究    趙青云

施用不同肥料對草莓生長和根系形態(tài)的影響及其機(jī)制    賴濤

煙草秸稈生物有機(jī)肥攜帶病毒的血清學(xué)檢測    張方

施用生物有機(jī)肥對鹽漬土改良效果及玉米產(chǎn)量的影響    耿澤銘

具有防治大白菜軟腐病功能的生物有機(jī)肥的研制    李娟

利用生物有機(jī)肥在西藏日喀則地區(qū)栽植雜交構(gòu)樹研究    劉曉宇

生物有機(jī)肥對烤煙氮磷鉀營養(yǎng)吸收及品質(zhì)的影響    彭華偉

生物有機(jī)肥對大蒜連作土壤酶、微生物及養(yǎng)分的影響    姜佳琦

不同生物有機(jī)肥對甜瓜土傳枯萎病防控效果及對根際土壤微生物區(qū)系的影響    高雪蓮

有機(jī)栽培條件下生物有機(jī)肥對稻田肥力和稻米品質(zhì)的影響    黃濤

生物有機(jī)肥對連作番茄和辣椒根際土壤微生物區(qū)系的影響    張鵬

產(chǎn)γ-聚谷氨酸菌株的篩選及其生物有機(jī)肥的生物效應(yīng)研究    尹成紅