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三苯甲烷酸性染料與血清白蛋白相互作用的光譜研究

來源:論文學(xué)術(shù)網(wǎng)
時間:2024-08-18 21:18:45
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三苯甲烷酸性染料與血清白蛋白相互作用的光譜研究【摘要】:第一章:本章簡要綜述了近二十年多來光譜法研究蛋白質(zhì)的研究進(jìn)展,闡述了研究蛋白質(zhì)與小分子探針作用的應(yīng)用以及相互作用機(jī)理,提出了

【摘要】:第一章:本章簡要綜述了近二十年多來光譜法研究蛋白質(zhì)的研究進(jìn)展,闡述了研究蛋白質(zhì)與小分子探針作用的應(yīng)用以及相互作用機(jī)理,提出了本文的立題意義及研究內(nèi)容。第二章:對兩種三苯甲烷酸性染料甲基藍(lán)和苯胺藍(lán)的紫外及熒光光譜特性進(jìn)行了詳細(xì)研究,測定了它的光譜學(xué)參數(shù)、熒光量子產(chǎn)率,并詳細(xì)考察了影響發(fā)光的影響因素(如pH值,離子強(qiáng)度,介質(zhì)條件),這為它們在化學(xué)生物分析中的應(yīng)用及其分析測定方法的建立提供了發(fā)光光譜學(xué)的理論依據(jù)。第三章:應(yīng)用熒光及紫外光譜法研究了甲基藍(lán)與人血清白蛋白(HSA)分子間的結(jié)合反應(yīng),測定了不同溫度下的結(jié)合常數(shù)(17℃,K_A=2.576×10~5;27℃,K_A:3.266×10~5;37℃,K_A=7.464×10~5)和結(jié)合位點(diǎn)數(shù)在不同溫度下均為1,實驗結(jié)果表明甲基藍(lán)對蛋白質(zhì)內(nèi)源熒光的猝滅機(jī)理為靜態(tài)猝滅,依據(jù)熱力學(xué)常數(shù)確定了兩者間的作用力類型為疏水作用力與靜電作用,根據(jù)Forster能量轉(zhuǎn)移理論,求得能量轉(zhuǎn)移效率和能量轉(zhuǎn)移距離分別為0.63和2.06。第四章:用熒光光譜法研究了水溶性苯胺藍(lán)與人血清白蛋白的結(jié)合反應(yīng)。苯胺藍(lán)對HSA的猝滅機(jī)理為靜態(tài)猝滅,測得了該反應(yīng)在不同溫度下的結(jié)合常數(shù)及結(jié)合位點(diǎn)數(shù),并探討了它們的相互作用機(jī)理,結(jié)果表明苯胺藍(lán)主要以靜電作用力與HSA相互作用。進(jìn)一步用同步熒光技術(shù)研究了AnB對HSA構(gòu)象的影響,結(jié)果表明,HSA的熒光主要源于色氨酸殘基,AnB對HSA的構(gòu)象產(chǎn)生了影響。第五章:本文的研究目的是以甲基藍(lán)為熒光探針,采用同步熒光法測定HSA。三苯甲烷酸性染料甲基藍(lán)在pH 4.1時以酸式存在。所以可以與HSA結(jié)合形成絡(luò)合物。當(dāng)在甲基藍(lán)溶液中加入HSA時,甲基藍(lán)的同步熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)。因此,基于甲基藍(lán)與HSA的相互作用建立了一種簡便、快速、高靈敏度、線性范圍寬的HSA測定方法。HSA的檢出限為0.03μg mL~(-1)。人血清樣品中的HSA測定結(jié)果滿意,證明了此方法的可 【關(guān)鍵詞】:熒光 同步熒光 共振光散射 三苯甲烷酸性染料 人血清白蛋白
【學(xué)位授予單位】:山西大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2006
【分類號】:Q51
【目錄】:
  • 中文摘要8-10
  • 英文摘要10-12
  • 第一章 綜述12-32
  • 1.1 引言12
  • 1.2 蛋白質(zhì)的光譜法研究進(jìn)展12-20
  • 1.2.1 吸光光度法12-16
  • 1.2.2 熒光光譜法16-18
  • 1.2.3 共振光散射光譜法18-19
  • 1.2.4 同步熒光法19
  • 1.2.5 磷光分析法19-20
  • 1.3 熒光法研究蛋白質(zhì)與探針相互作用機(jī)理20-23
  • 1.3.1 相互作用模型20-22
  • 1.3.2 相互作用力類型22-23
  • 1.4 立題背景及意義23
  • 1.5 本文研究內(nèi)容23-24
  • 參考文獻(xiàn)24-32
  • 第二章 甲基藍(lán)和苯胺藍(lán)的光譜特性研究32-40
  • 2.1 引言32-33
  • 2.2 實驗部分33
  • 2.2.1 試劑與儀器33
  • 2.2.2 實驗步驟33
  • 2.3 結(jié)果與討論33-39
  • 2.3.1 甲基藍(lán)與苯胺藍(lán)的紫外可見光譜特性33-35
  • 2.3.2 甲基藍(lán)與苯胺藍(lán)的熒光光譜特性35-38
  • 2.3.3 分析特性38-39
  • 2.4 結(jié)論39
  • 參考文獻(xiàn)39-40
  • 第三章 熒光法研究甲基藍(lán)與人血清白蛋白的相互作用40-48
  • 3.1 引言40
  • 3.2 實驗部分40-41
  • 3.2.1 試劑和儀器40-41
  • 3.2.2 實驗方法41
  • 3.3 結(jié)果與討論41-46
  • 3.3.1 甲基藍(lán)對HSA的熒光猝滅類型41-43
  • 3.3.2 結(jié)合常數(shù)及結(jié)合位點(diǎn)43-44
  • 3.3.3 作用力類型的研究44-45
  • 3.3.4 甲基藍(lán)與HSA之間的能量轉(zhuǎn)移45-46
  • 3.4 結(jié)論46
  • 參考文獻(xiàn)46-48
  • 第四章 熒光法研究苯胺藍(lán)與人血清白蛋白的相互作用48-55
  • 4.1 引言48
  • 4.2 實驗部分48-49
  • 4.2.1 儀器與試劑48-49
  • 4.2.2 實驗方法49
  • 4.3 結(jié)果與討論49-53
  • 4.3.1 AnB對HSA的熒光猝滅類型49-50
  • 4.3.2 結(jié)合常數(shù)和結(jié)合位點(diǎn)數(shù)的測定50-51
  • 4.3.3 AnB與HSA的作用方式51-52
  • 4.3.4 AnB對HSA構(gòu)象的影響52-53
  • 4.4 結(jié)論53
  • 參考文獻(xiàn)53-55
  • 第五章 甲基藍(lán)為探針同步熒光法測定人血清白蛋白55-63
  • 5.1 引言55
  • 5.2 實驗部分55-56
  • 5.2.1 試劑與儀器55-56
  • 5.2.2 實驗步驟56
  • 5.3 結(jié)果與討論56-61
  • 5.3.1 甲基藍(lán)與HSA結(jié)合的同步熒光光譜56-58
  • 5.3.2 甲基藍(lán)濃度的影響58
  • 5.3.3 酸度和溫度的影響58-59
  • 5.3.4 分析方法的建立59-60
  • 5.3.5 干擾實驗60
  • 5.3.6 樣品分析60-61
  • 5.4 結(jié)論61
  • 參考文獻(xiàn)61-63
  • 第六章 甲基藍(lán)與人血清蛋白作用的共振光散射光譜及其應(yīng)用63-71
  • 6.1 引言63
  • 6.2 實驗部分63-64
  • 6.2.1 儀器與試劑63
  • 6.2.2 實驗方法63-64
  • 6.3 結(jié)果與討論64-69
  • 6.3.1 共振光散射原理64
  • 6.3.2 甲基藍(lán)與HSA相互作用的RLS光譜64-65
  • 6.3.3 適宜的反應(yīng)條件65-67
  • 6.3.4 分析測定67-68
  • 6.3.5 機(jī)理探討68-69
  • 6.4 結(jié)論69
  • 參考文獻(xiàn)69-71
  • 第七章 β-CD和HP-β-CD對甲基藍(lán)與HSA相互作用的影響71-79
  • 7.1 引言71
  • 7.2 實驗部分71-72
  • 7.2.1 試劑與儀器71
  • 7.2.2 實驗步驟71-72
  • 7.3 結(jié)果與討論72-78
  • 7.3.1 HSA與甲基藍(lán)的相互作用72-73
  • 7.3.2 甲基藍(lán)與β-CD和HP-β-CD的作用研究73-75
  • 7.3.3 甲基藍(lán)與β-CD和HP-β-CD作用的包結(jié)比和包結(jié)常數(shù)測定75-76
  • 7.3.4 CDs、甲基藍(lán)與HSA三者的作用研究76-78
  • 7.4 結(jié)論78
  • 參考文獻(xiàn)78-79
  • 附錄: 碩士期間發(fā)表的論文題錄79-80
  • 致謝80-81
  • 發(fā)表論文81-86
  • 承諾書86


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