維藥榅桲籽二氯甲烷提取物對哮喘大鼠氣道炎癥與嗜酸性粒細胞凋亡的影響

【摘要】：目的:建立哮喘動物模型,從組織、細胞形態(tài)及分子水平變化探究榅桲籽二氯甲烷提取物(Qs-E)對哮喘大鼠氣道炎癥、嗜酸性粒細胞凋亡及調(diào)控基因表達的影響。方法:將健康雄性SD大鼠72只,隨機分為:正常對照組、哮喘模型組、地塞米松陽性對照組、Qs-E低劑量組、Qs-E中劑量組、Qs-E高劑量組,每組12只。除了正常對照組外,其余各組以卵清蛋白(OVA)刺激及致敏的方法建立哮喘大鼠模型。正常對照組以磷酸鹽緩沖液(PBS)代替進行致敏,分別給予藥物干預,末次給藥后處死動物,采集標本。顯微鏡觀察支氣管肺組織形態(tài)學的改變,用SYSMEX全自動血細胞分析儀(動物專用)計數(shù)肺泡灌洗液(BALF)中的白細胞(WBC)及嗜酸性粒細胞(EOS)個數(shù),酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測肺組織勻漿液中的白介素4和5(IL-4、IL-5)、白三烯B4(LTB4)、總免疫球蛋白、特異性面免疫球蛋白(IgE)含量,硝酸氧化酶還原法檢測肺組織一氧化氮(NO)含量,凝血酶適體顯色法檢測肺組織丙二醛(MDA)含量,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶(SOD)活性,還原性谷胱甘肽對過氧化氫的還原法檢測谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性,SP免疫組織化學方法檢測肺組織中環(huán)氧合酶-2(COX-2)和脂氧合酶-5(5-LOX)含量及分布,TUNEL法檢測肺組織中EOS凋亡,原位雜交法檢測肺組織Fas、Bcl-2的表達。相關(guān)的實驗數(shù)據(jù)用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學處理。結(jié)果:(1)與正常對照組比較,哮喘模型組肺組織中有大量的EOS、淋巴細胞等炎癥細胞浸潤,IL-4、IL-5、特異性IgE、總IgE、LTB4、NO及MDA含量升高,GSH-PX、SOD活力降低,COX-2及5-LOX高表達,Fas低表達和Bc1-2高表達,EOS凋亡減少,說明哮喘模型在氣道存在炎癥細胞聚集,炎癥因子產(chǎn)生增多,氧化應激反應升高及EOS凋亡不足的病理狀態(tài),該實驗動物模型建立成功;(2)與哮喘模型組比較,Qs-E降低BALF中白細胞及EOS數(shù)量,IgE、IL-5、IL-4、LTB4等炎癥因子降低肺組織中NO、MDA等氧化自由基的含量而間接的增強了SOD、GSH-PX等抗氧化酶的活性,抑制COX-2及5-LOX的表達,促進肺組織Fas表達、抑制Bcl-2表達,促進肺組織EOS凋亡。各治療組間療效比較,其中榅桲籽高劑量組總體療效最為顯著。結(jié)論:維藥Qs-E通過促進細胞凋亡,抑制炎癥因子產(chǎn)生的途徑,改善哮喘大鼠的肺功能,減輕氣道炎癥,發(fā)揮抗炎、平喘作用,從而達到一定的干預目的。其中Qs-E高劑量組與低劑量組比較,GSH-PX等指標活性顯著升高,存在劑量依賴關(guān)系。 【關(guān)鍵詞】：榅桲籽二氯甲烷提取物 哮喘 抗炎 細胞凋亡
【學位授予單位】：新疆醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R29
【目錄】：

• 中英文縮略詞對照表5-8
• 摘要8-10
• Abstract10-12
• 前言12-16
• 研究內(nèi)容與方法16-24
• 1 研究對象及實驗材料16-18
• 1.1 研究對象16
• 1.2 試劑16-17
• 1.3 儀器17-18
• 2 實驗內(nèi)容與方法18-23
• 2.1 哮喘大鼠動物模型的建立18
• 2.2 榅桲籽二氯甲烷提取部位對哮喘大鼠氣道炎癥的影響18-21
• 2.3 榅桲籽二氯甲烷提取部位對哮喘大鼠細胞凋亡及調(diào)控基因表達的影響21-23
• 3 統(tǒng)計學分析23-24
• 結(jié)果24-30
• 討論30-37
• 小結(jié)37-38
• 致謝38-39
• 參考文獻39-43
• 附圖43-46
• 綜述46-52
• 參考文獻50-52
• 攻讀碩士期間發(fā)表的學位論文52-53
• 導師評閱表53

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