甲基單胞菌Methylomonas sp.GYJ3中甲烷單加氧酶羥基化酶組分的純化和性質(zhì)

【摘要】：Methylomonassp．GYJ3菌株中經(jīng)DEAE-SepharoseCL-6B陰離子交換層析和SephacrylS300凝膠層析分離純化出甲烷加氧酶羥基化酶組分．經(jīng)HPLC分析，純度大于90％，分子量為240kD，純化倍數(shù)為3．9，比活為225nmol環(huán)氧丙烷每分鐘毫克蛋白．SDS-PAGE表明，羥基化酶由三個亞基組成，亞基分子量為56、43、27kD．ICPAES測定羥基化酶的Fe含量為2.1molFe每摩爾蛋白．HPLC法用于甲烷單加氧酶羥基化酶組分的純化，純化的羥基化酶組分比活為541nmol（環(huán)氧丙烷）每分鐘毫克蛋白，是兩步LC法純化的羥基化酶的兩倍，F(xiàn)e含量為3．78molFe每摩爾蛋白．催化性質(zhì)研究表明羥基化酶能夠被化學(xué)還原劑還原為還原態(tài)羥基化酶，還原態(tài)的羥基化酶單獨存在時表現(xiàn)出MMO活性，說明它是MMO活性中心，天然態(tài)的羥基化酶單獨存在時無MMO活性，加入粗酶液中MMO活性明顯增加，說明GYJ3菌中MMO是一個復(fù)合酶系． 【作者單位】： 中科院蘭州化學(xué)物理研究所羰基合成與選擇氧化國家重點實驗室!蘭州 730000 中國科學(xué)院生理物理研究所生物大分子國家重點實驗室!北京 100101 中國科學(xué)院生理物理研究所生物大分子國家重點實驗室!北京 100101 中國科學(xué)院生理物理研究所生物大分子國家重點實驗室!北京 100101
【關(guān)鍵詞】： 甲基單胞菌 甲烷利用細菌 甲烷單加氧酶 羥基化酶
【基金】：國家自然學(xué)基金!29471030 中科院”八五”重點應(yīng)用項目!KM85-02
【分類號】：Q55
【正文快照】： 甲烷單加氧酶（EC．1．14．13．25，methanemonooxygenase，MM（））是甲烷利用細菌（methanotrophicbacteria）代謝過程中的重要酶系，在細菌細胞內(nèi)MMO直接利用分子氧作為底物催化甲烷氧化成甲醇．MMO能夠催化烷烴羥基化反應(yīng)和烯烴環(huán)氧化反應(yīng)，因此，它是一種具有應(yīng)用前景的

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